（一）流行病學資料 應注意當地流行狀況，是否曾赴流行地區出差旅游。周圍有無類似患者，以便協助診斷。
（二）臨床表現 主要為發熱、咽痛、頸部及其它部位淋巴結腫大，肝脾腫大，多形性皮疹，但本病臨床表現變異較大，散發病例易誤診，尤其在無實驗室檢查條件的情況下，診斷困難較大。
（三）實驗室檢查
1．血象 白細胞總數正常或稍增多，最高可達30～50×109/L。單個核細胞（淋巴細胞、單核細胞及異型淋巴細胞）可達60%以上，其中異型淋巴細胞可在10%以上。
2．嗜異性凝集試驗（heterophil agglutination test）是一標準的診斷性試驗，其原理為患者血清中常含有屬于IgM的嗜異性抗體可與綿羊或馬紅細胞凝集。該試驗在病程早期即呈陽性，約為40%，第二、三周陽性率分別可達60%及80%以上，恢復期迅速下降。正常人、血清病患者、淋巴網狀細胞瘤、單核細胞白血病及結核病等患者，血清中也可出現嗜異性抗體，可用豚鼠腎和牛紅細胞吸收試驗加以鑒別（表1），一般認為經豚鼠腎吸收后的滴定效價在1：64以上者具有診斷意義。
3．EBV抗體檢測 抗EBV有對VCA、EA、EBNA的抗體及補體結合抗體、中和抗體等。其中以抗-VCAIgM、和IgG較為常用，前者出現早、消失快、靈敏性與特異性高，有早期診斷價值，后者出現時間早，滴度較高且可持續終身，宜用于流行病學調查。
4．EBV的檢測 較為困難，且在健康人及其他疾病患者中亦可檢出病毒，故很少用于臨床診斷。
本病應與以咽峽炎表現為主的鏈球菌感染、皰疹性咽峽炎、風濕熱等，以發熱、淋巴結腫大為主要表現的結核病、淋巴細胞白血病、淋巴網狀細胞瘤等，以黃疸、肝功異常為特征的病毒性肝炎及化驗改變較類似的傳染性淋巴細胞增多癥、巨細胞病毒感染、血清病等進行鑒別。此外本病還需與心肌炎、風疹、病毒性腦炎等相鑒別。