惡性腫瘤的發生、發展與機體免疫系統密切相關。運用流式細胞術的方法，檢測T淋巴細胞表面抗原（CD₃、CD₄、CD₈），B淋巴細胞表面抗原（CD₁₉、CD₂₀），NK細胞表面抗原（CD₁₆₊₅₆）在惡性腫瘤病人外周血中的表達，并檢測活化T、B、NK淋巴細胞的免疫指標（CD₃/HLA-DR、CD₃/CD₂₅）的變化，探討淋巴細胞在腫瘤中的表達狀況及其意義，并進一步分析惡性腫瘤病人免疫治療前后的免疫功能改變，以致使我們更深一層認識腫瘤在細胞水平的免疫功能。

1、資料與方法

1.1  研究對象  2003年8月～2004年5月本院腫瘤科病房50例惡性腫瘤病人，均經病理確診，其中肺癌23例，肝癌6例，乳癌4例，胃癌5例，胰腺癌2例，淋巴瘤4例，結腸癌3例，鼻咽癌1例，腎癌2例。男28例，女22例，年齡29～65歲，平均57歲。其中10例（肺癌6例，淋巴瘤4例）年齡29～53歲，平均41歲，經免疫增強劑（高聚生4ml靜滴，每日1次，共3個月；白介素Ⅱ30萬U皮下注射，每周2次，共3個月）治療一療程（3個月）后，復查一次。

對照組31例為健康體檢者，男18例，女13例，年齡36～50歲，平均43歲，其中年齡和性別構成比與病人組差異無顯著性（P＞0.05）。

1.2  材料與儀器  小鼠抗人單克隆抗體CD₄/CD₈/CD₃、CD₁₉、CD₂₀、CD₃/CD₁₆₊₅₆、CD₃/HLA-DR、CD₃/CD₂₅及同型對照、紅細胞裂解液（Optilyse C）均為法國Immunotech公司出品。流式細胞儀（Epics XL·MCL）是美國BECKMAN  COULTER公司生產。

1.3  研究方法  使用直接免疫熒光標記全血溶血法，流式細胞儀測定腫瘤病人外周血淋巴細胞表面抗原表達。
　　1.3.1  淋巴細胞表面標記  取熒光標記單克隆抗體CD₄/CD₈/CD₃、CD₃/CD₁₆₊₅₆、CD₃/HLA-DR、CD₃/CD₂₅、CD₁₉、CD₂₀各10μl放入試管中，分別加入外周全血100μl，室溫避光孵育15min。并作同型對照。
　　1.3.2  溶血  加入Optilyse C500μl，混勻，室溫避光10min。
　　1.3.3  洗滌  離心（1500r/min）5min，棄去上清液，加入PBS液1ml，混勻。重復洗滌1次。
　　1.3.4  重懸  加入1ml PBS，混勻，制成單細胞懸液。
　　1.3.5  檢測  上機，每個樣品檢測5000個以上細胞，用FCM軟件分析，計算淋巴細胞中各標記細胞的百分率。最后所有數據應用SPSS進行統計學處理。

2、結果

對50例惡性腫瘤病人與31例健康體檢者進行外周血淋巴細胞表面抗原FCM檢測，做統計學分析，結果見表1。

注：與對照組相比，* P<0.01，** P<0.05