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  • 發布時間:2019-04-09 21:51 原文鏈接: 成年小鼠的灌流實驗

    成年小鼠的灌流實驗主要用于:(1)獲得良好的形態學觀察結果;(2)保存腦、腎、心臟和其他器官

    實驗方法原理

    進行實驗動物灌流是獲得良好的形態學觀察結果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。

    實驗材料

    小鼠

    試劑、試劑盒

    PBS

    儀器、耗材

    23-G針頭注射管解剖器械

    實驗步驟

    1.  一支針管吸滿1×PBS,另一支吸4%PFA固定液(4℃),擱置待用。

     

    2.  在袋中用CO2氣體處死小鼠。停止吸呼后,立刻背朝下放平小鼠,小心剖開胸腔防止過多出血,小心并迅速切開肋骨,剪去橫隔膜,暴露心臟。

     

    3.  小心將吸有1×PBS的針管刺入左心室,剖開右心室排液。緩慢但持續將1×PBS灌入心臟(如灌流正常,血液豐富器官,如肝臟,脾臟和腎臟將轉呈灰白色)。


    4.  當多數血液已流出后,撥去1×PBS的針管將吸有4%PFA固定液的針管插入左心室同一進針處,以20 ml 固定液緩慢灌流小鼠。

     

    5.  灌流后,剖下器官或組織,放入盛有4%PFA固定液的做好標記玻璃瓶中,于冰上保存。

    展開 
    注意事項

    對于未經訓練的實驗人員,初次進行灌流可能會失敗,故建議首先用一些對照實驗動物練習,以熟悉此過程。 


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