采用手性固定相或添加了手性試劑的流動相進行手性異構體（對映體）分離的色譜技術。液相色譜和氣相色譜都可以進行手性異構體分離。它利用手性固定相或手性流動相中的手性試劑與被測手性異構體分子的空間和特異相互作用的差異，將對映體拆分開。手性色譜在生物和醫藥領域具有重要應用
手性藥物編輯
化合物中某個碳原子上連接4個互不相同的基團時，該碳原子被稱為手性碳原子或手性中心，分子中含有手性中心的藥物稱為手性藥物。
手性藥物一般用左旋體（levorotatory）或右旋體（dextrotatory）表示，左旋體在藥物名稱前冠l-或（一）-；右旋體冠d-或（+）-；左旋體和右旋體的等量混合物稱為外消旋體（racemate or racemic mixture），名稱前冠（dl）-或（±）-。對于糖類、氨基酸等立體化學構型，也可以用D型和L型表示；按照手性中心連接取代基原子序數排列順序，也有用R型、s型表示的。
目前臨床應用的手性藥物中，除天然和半合成藥物外，人工合成的手性藥物仍以外消旋體為主。然而在外消旋體藥物中各對映體間的藥效學，藥動學以及毒性常有很大差異。很多情況是一種對映體有活性，而另一種沒有或活性很低，甚至有較大毒性。因此有必要研究建市快速、準確、靈敏、簡便的分離分析對映體藥物的方法。
手性藥物分離方法編輯
手性藥物分離方法很多，其原理大都是將對映體的混合物轉換成非對映體異構體，然后再利用它們理化性質上的差異使之分離。主要可分為兩大類，即色譜法與非色譜法。非色譜法主要有結晶法，也包括微生物或酶消化法。但是這些方法耗時較長，過程復雜，純度較差，且難于進行微量分離和測定，具有局限性。色譜法成為目前手性藥物分離分析的主要方法，包括薄層色譜、氣相色譜、高效液相色譜、超臨界流體色譜和毛細管電泳等。