批量層析法
| 實驗方法原理 | 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 蛋白質溶液 |
| 儀器、耗材 | 離子交換層析裝置 |
| 實驗步驟 |
1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂,不斷攪拌以促進平衡; 2. 傾瀉掉大部分溶液,保留的溶液置要使樹脂能輕松的攪拌; 3. 加入樣品; 4. 放置 1 h,使蛋白質與樹脂充分結合,中間須攪拌幾次; 5. 過濾樹脂,注意不要使樹脂脫水; 6. 用原始溶液在濾器上輕柔的潤洗樹脂; 7. 將樹脂重新放入燒杯中,用離子強度大的溶液處理; 8. 過濾樹脂,檢測洗脫液中是否含有蛋白質; 9. 若有必要,用離子強度更大的溶液處理樹脂,直至目的蛋白被洗出。
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