經體內免疫后再進行細胞融合是制備抗體酶的一種傳統方法。雜交瘤技術的基本原理是用不能在培養液中生長的但能產生抗體的脾臟細胞，與能在培養液中生長的骨髓瘤細胞進行融合，融合得到的雜交細胞既能產生抗體又能在體外培養，通過選擇培養，以獲取能產生單克隆抗體的雜交瘤細胞。再把這些細胞單克隆化，即繁殖成母體的同一細胞或形成菌落。這些菌落能夠產生單一均勻的抗體，可用于進行單克隆抗體的擴大生產。對這些菌落用酶聯免疫吸附法等方法加以篩選。該制備方法的關鍵是要有合適而穩定的過渡態模擬物作半抗原，以產生與過渡態高度親和的抗體酶。由于大多數反應過渡態類似物的分子量較低，即所謂的半抗原，他們本身免疫原性很弱，必須與某種載體偶聯才能表現免疫原性。本方法所得到的抗體酶的催化能力的高低，在很大程度上取決于化學模型物的設計，現在應用的設計策略包括：誘導和轉化設計，反應免疫，“潛過渡態”半抗原設計等等。