抗肽抗體的制備實驗1

抗體

磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS

分光光度計離心機

1.  將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中，置于一個2 ml 的玻璃試管，加50 μl MBS/DMF溶液，于室溫下溫和攪拌30 min。

2.  加樣到PD-10柱子上，上柱前用10 ml 的0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液預平衡柱子。

3.  上樣后每0.6 ml 加I為一組分分部收集洗脫液，監測A₂₈₀并收集第一個蛋白峰。

4.  匯集第一個峰的洗脫液于15 ml 的玻璃試管中。

5.  將10 μmol 的肽溶于20 mmol/l EDTA中，終濃度約為1 mg/ml。

6.  將其加到裝有MBS/BSA復合物的玻璃試管中。

7.  于室溫下在，氮氣中振搖4 h，于4℃對3 l PBS透析過夜。

8.  換PBS后繼續透析4 h。

9.  將樣品獨立分裝成小份，貯存于-20℃。