將定量的鏈球菌溶血素“O”加入倍比稀釋的患者血清中，再加入兔或羊紅細胞，若患者血清中含有抗鏈球菌溶血素“O”，便會與鏈球菌溶血素“O”中和，紅細胞不溶解。
若患者血清中不含有抗鏈球菌溶血素“O”，則紅細胞溶解。完全不溶血的血清最高稀釋倍數，即代表抗鏈球菌溶血素“O”的效價。
