分離純化蛋白質的原理與方法──凝膠色譜法(分子篩效應)凝膠是一些由多糖類化合物構成的多孔球體，當相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時，相對分子質量較小的蛋白質直徑小于凝膠網孔，由于靜電吸附和擴散作用容易進入凝膠內部的通道，可以自由地進入凝膠顆粒的網孔，在向下移動的過程中，它們從凝膠顆粒的網孔擴散到凝膠顆粒間的孔隙，再進入另一凝膠顆粒的網孔，如此不斷地進出，使流程增長，而最后流出層析柱。而相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠顆粒的網孔，只能沿著凝膠顆粒間的孔隙，隨著洗脫液流動，流程較短，因此首先流出層析柱。分子量介于二者之間的物質，雖然能夠進入凝膠網孔，但比小分子難，因此進入凝膠網孔的幾率比小分子小，向下移動的速度比小分子快，而比大分子慢。相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分離。需要注意的是，有部分小分子蛋白質未進入凝膠內部，而在外部移動，因此，如果需要得到純度更高的蛋白質分子，可將色譜柱中的凝膠溶液進行平衡后進行再次冼脫和分離。