【摘要】 目的：提高血清肌酐測定的準確性。方法：用雙液體試劑中的RI液和標本進行反應，使膽紅素氧化成膽綠素，再進行肌酐的測定，并與原法對比。結果：原法受膽紅素的干擾，雙液體兩步法可有效消除膽紅素的影響。結論：雙液體兩步法消除了膽紅素對肌酐測定的干擾，操作簡單，結果可靠，經濟實用，適合推廣。
【關鍵詞】 堿性苦味酸法;肌酐;膽紅素
血清肌酐(CREA)測定是臨床中常用的檢測項目，也是急診腎功能檢測項目之一。血清肌酐值是評價腎小球濾過率(GFR)及診斷急性、慢性腎功能衰竭的有效指標。目前，我國臨床實驗室測定血清肌酐的方法主要有兩種：一類是堿性苦味酸法，另一類是酶學測定法。酶法試劑價格昂貴，尚不能達到普及，堿性苦味酸法是目前主要肌酐測定方法[1]。但這種方法的主要缺點是受高膽紅素負干擾而致結果明顯偏低，甚至出現負值。現將雙液體試劑反應步驟進行了改進，把原來的一步法改為兩步法，可有效地消除膽紅素對肌酐測定的負影響。現報告如下。
1 材料與方法
1.1 試劑：堿性苦味酸試劑(試劑R1：320 mmol/L氫氧化鈉;試劑R2：35 mmol/L苦味酸，北京中生提供)。肌酐標準液、高、低定值質控血清由英國朗道提供。儀器使用日立7180型全自動生化分析儀。
1.2 方法：①10 μl血清[總膽紅素(TBIL)408 μmol/L]與200 μl試劑R1(320 mmol/L氫氧化鈉)混合后，連續檢測該混合物分別在510 nm和620 nm處吸光度的變化。結果發現48 s以后510 nm吸光度下降緩慢或基本不變，而620 nm處吸光度在32 s后上升緩慢或基本不變。膽紅素被氧化成膽綠素的反應主要發生在標本和RI液混合后50 s以內。②根據上述發現并結合日立7180型全自動生化分析儀的特點，調整反應參數。10 μl血清與100 μl試劑R1(320 mmol/L氫氧化鈉)反應16 s后加入100 μl試劑R2(35 mmol/L苦味酸)，在試劑R2加入后16 s讀取起始吸光度(A1)，再過48 s讀取終末吸光度(A2)，計算時用A2-A1=ΔA。肌酐的含量為:肌酐(μmol/L)=樣品ΔA/標準ΔA×標準濃度(μmol/L)。主波長510 nm，副波長660 nm，反應溫度37 ℃。