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  • 發布時間:2021-05-13 10:03 原文鏈接: 放射免疫分析的原理詳述(二)

    非競爭性RIA,又稱免疫放射分析(IRMA) 

     主要特點:標記的是抗體。 按反應原理分為兩種: (一)單位點IRMA 其原理:抗原只有一個抗原決定簇,所測的抗原為小分子抗原,Ab+AgAg Ab+ Ab+ ImAd—Ag ImAd—AgAb+Ag Ab(去除)(負相關):(ImAd—Ag)固相抗原免疫吸附劑,一般用聚苯乙烯塑料珠包被抗原;雙位點IRMA:抗原有兩個抗原決定簇,所使用的兩種亞型抗體在與同一抗原分子結合時互不干擾ImAd—Ab+AgImAd—Ab—Ag+ AbImAd-Ab—Ag- Ab+ Ab(過剩的,游離的):(ImAd—Ab)固相抗體免疫吸附劑,一般用聚苯乙烯塑料珠包被抗體。 (二)雙位點IRMA,又稱雙抗體夾心法 從加樣測定順序上看,有三種方法:固相抗體先與未知抗原結合,再與標記抗體結合(正向兩步法)。然后去除游離的標記抗體,測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數;未知抗原先與標記抗體結合,再與同相抗體結合(反向兩步法)。然后去除游離的標記抗體,測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數;未知抗原與固相抗體和標記抗體同時反應(一步法,又稱同時加樣法)。然后去除游離的標記抗體,測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數。 這三種方法都生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物,故又稱雙抗體夾心法。 糖類抗原CA50,CA125就用的是其中的第三種方法(一步法),血清中的未知抗原與固相抗體和標記抗體同時反應,生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物,然后去除游離的標記抗體,測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數。

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