液相色譜儀被廣泛用于合成化學、石油化學、生命科學、臨床化學、藥物研究、環境監測、食品檢驗及法學檢驗等領域。液相色譜儀屬于精密檢測儀器,需要定期科學有效地維護儀器,教你幾招液相色譜儀各部件的維護技巧。
一、色譜柱的維護和保存
①每次分析結束后,都要對色譜柱進行沖洗。每次工作完后,zui hao用洗脫能力強的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當采用鹽緩沖溶液作流動相時,使用完后應用無鹽流動相沖洗;
②凈化樣品,樣品中的微粒會進入色譜柱,在柱頭上沉積下來,造成柱壓升高,柱效降低;
③避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況。因此在安裝時要輕拿輕放。
④柱壓避免急劇變化;
⑤注意色譜柱的使用方向,色譜柱所示方向是評價流動相流動方向。不可以反沖會迅速降低柱效。
⑥若長時間不用該色譜柱,要沖洗好后,用純甲醇或乙腈封存。反相柱C18應保存在純有機相或50%有機相中,一周不用要卸下,兩端用堵頭密封,避免干枯。
二、液相泵的日常維護
泵的密封圈是最易磨損的部件,密封圈的損壞可能引發漏液或劇烈壓力波動;單向閥的正常工作至關重要,它若發生故障,將直接影響流速的穩定性。
日常維護應注意以下幾點:
①防止任何固體微粒進入泵體,因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環等,泵的入口應經常清洗或更換。
②使用液質聯用級(LCMS級)的溶劑和試劑,實驗用水應為超純水,并通過濾膜過濾;
②壓力不要超過規定的最高壓力,否則會使高壓密封環變形漏液。;
③使用完緩沖液體系后用純水沖洗干凈,防止鹽沉積,系統不運行時應存儲在無緩沖液的溶液或有機溶劑中;
④密封圈按照各個生產廠商的建議定期更換。
⑤要防止溶劑瓶內的流動相用完,空泵運轉會磨損柱塞或密封環,最終產生漏液。
⑥流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內。尤其是在停泵過長時間情況下。由于溶液靜置,就可能析出鹽的微細晶體。同樣會損壞密封環、柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗。再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑。
三、檢測器的維護
作為液相色譜儀的三大關鍵部件(輸液泵、色譜柱、檢測器)之一的檢測器,主要用于監測經色譜柱分離后的組分濃度的變化,將樣品組成和含量變化轉化為可供檢測的信號,完成定性、定量分析。常用的檢測器主要有紫外檢測器、熒光檢測器等。
(1)紫外檢測器的使用與維護
使用紫外檢測器時要注意環境因素帶來的干擾由于靜電的作用,檢測器在使用時易于從周圍環境中吸附塵埃,覆蓋在光學元件上的塵埃能降低光的傳播效率,加大了光的散射,對檢測有影響。故紫外檢測器周圍的環境要清潔,經常打掃,保持干凈。強紫外照射還會使一些光學材料涂層降解,慢慢增加噪聲,故檢測器應避免陽光直射。長時間不用檢測器時,應定期沖洗流路趕走池內產生的氣泡。
(2)熒光檢測器的使用與維護
熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器高,特別適用于痕量組分檢測。日常使用中應注意以下幾點:
①不能使用抑制或吸收熒光的溶劑作流動相仁。
②溶劑的極性和溶液的溫度對熒光強度有明顯的影響。增大溶劑的極性,導致熒光增強。通常熒光物質溶液的熒光效率和熒光強度,隨著溫度的升高而降低,液相色譜中,熒光檢測器通常在室溫下操作,可以保證足夠的靈敏度。
四、進樣器的日常維護
自動進樣器維護主要是要防止鹽析出結晶磨損定量環與密封圈等位置。主要維護手段就是洗針和排氣。進樣前要進行排氣,進樣后進行洗針,洗針溶劑要能夠保證有機相能夠將有機物溶解,水相能夠將緩沖鹽溶解,防止析出發生。另外需要注意六通閥的清潔,經常使用高濃度鹽溶液會造成六通閥外部有鹽析出,注意清潔,用水沖洗溶解(盡量不要直接擦拭,容易造成劃痕)外部干凈后,用酒精擦拭晾干即可。
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