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  • 發布時間:2020-05-18 11:41 原文鏈接: 數據非依賴采集DIA解決方案(三)

     

    圖 9. 三步完成 DIA 方法編輯

     

    典型 DIA 數據如圖 10 所示,從色譜圖上看 DIA 數據與傳統 Shotgun 數據沒有明顯區別,只是每個循環的二級譜圖數量固定,因此掃描點分布均勻。

     

    圖 10. 典型的 DIA 數據

     

    圖 11. 四步完成 msxDIA 方法編輯

     

    2. msxDIA

    Orbitrap 具有的獨一無二的 msxDIA 方法設置同樣簡單易用,只多一步隨機 Inclusion list 生成(圖 11): (1) 在模板中將 DIA 模塊拖入方法流程(若加入一級掃描,則在 DIA 模塊前拖入 Full Mass 模塊);(2) 以 2 x 10 m/z 為例,DIA 模塊中的 MSX count 設為 2,窗口寬度設為 10 m/z ,即完成 2 x 10 m/z 模式參數設置;(3) 使用 Skyline 軟件生成隨機的 Inclusion list 表;(4) 將隨機 Inclusion list 表導入方法的 Inclusion list 中,完成方法設置,即刻可以開始 msxDIA 數據采集。

     

    典型 msxDIA 二級質譜圖如圖 12 所示,每張譜圖包含 2 個(2 x 10 m/z 模式)或 5 個(5 x 4 m/z 模式)窗口的碎片信息,即一次掃描采集 2 個或 5 個窗口,分析效率顯著提高,選擇性也因窗口縮小而明顯改善。

     

    圖 12. 典型的 msxDIA 二級質譜圖

     

    六、數據分析

    DIA/SWATH 數據復雜、信息量龐大,因此,高效、可靠的數據解析和信息挖掘是 DIA/SWATH 分析的瓶頸。


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