| 實驗方法原理 | 打開顯微鏡,校準光路。在標本有關區域聚焦。檢査相機與電腦的連接,將光導向相機,聚焦,保存圖像。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 待檢査培養物 |
| 儀器、耗材 | 倒置顯微鏡 鏡頭紙 圖像記錄紙 測微尺 |
| 實驗步驟 | 1. 準備照相用的培養物(確保培養物沒有碎片一如在照相前更換原代培養液) (a)培養瓶培養 i)將培養瓶拿到超凈臺中,松開瓶蓋,冷卻培養物。 ii)當培養物溫度為室溫時,蓋緊瓶蓋。可避免冷卻引起的變形。 iii)轉動培養液沖洗培養瓶頂部的內面,移除可能形成的冷凝物。 iv)直立培養瓶,使培養液流下。 (b)培養皿或培養板培養物 i)在超凈臺中,冷卻培養物。 ii)更換培養皿或培養板的蓋子(確保樣品標記在培養皿或培養板的底部)。 2. 選擇視野和放大倍數(4× 最適于克隆或單層細胞排列方式;10× 適于典型圖片;20× 適于細胞細節的圖片),避開培養瓶上的瑕疵或標記(總在培養瓶或培養皿的側面作標記,而不是頂部或底部)。(倒置顯微鏡配備以下附件:10×、20× 或40× 相差物鏡;帶適于10× 、20× 或40× 物鏡的相差環的聚光器;三筒機頭或其他適于CCD 相機的接口;中性密度濾光片,2× 和4×。) 3. 檢査焦距 (a)利用取景框或物鏡中的標線,調節雙同目鏡的焦距,適合自己的眼睛; (b)聚焦顯微鏡。 4. 打開顯示器,檢査屏幕上圖像的密度和對比度,黑白照相利用變阻器調節顯微鏡光線強度,彩色照相利用中性密度濾光片調整(如果色溫不正確,照片可在后期電子加工處理)。 5. 如果需要,再聚焦顯微鏡。 6. 用適宜于最終用途及存儲設備允許的分辨率存儲照片(如 940 × 740 需要 2 Mb 存儲空間,如果洗印 5 × 7 英寸即 12 cm × 18 cm 圖片時,質量合適)。 7. 調低電源亮度,防止培養物過熱。(可用紅外濾光片將過熱程度降到最低。) 8. 在同樣放大倍數下,用測微尺重復步驟 3~6 , 得出放大倍率。如果圖像采用相同的方式處理,則可用作標尺。 9. 將培養物重新放回培養箱。 10. 根據保存的文件名,完成圖片拍攝內容的記錄,否則圖像難以辨認。 11. 圖像可使用 Adobe PhotoShop 程序存儲、觀看、編輯或進行格式化處理, 也可使用高質量噴墨或彩色激光打印機和柯達 ColorEase 打印圖片。 |
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