暗視野顯微鏡基本結構是將普通顯微鏡光學組加上擋光片。普通顯微鏡只要聚光器是可以拆卸的,支架的口徑適于安裝暗視野聚光器,即可改裝成暗視野顯微鏡。
在無暗視野聚光時,可用厚黑紙片制作一個中央遮光板,放在普通顯微鏡的聚光器下方的濾光片框上,也能得到暗視野效果。擋光片是用來擋住光源中間的光線,讓光線只能從周圍射入標本,大小約和光圈大小相同。不同倍率用不同的光圈,所以要制作不同的擋光片。