1. 電極拉制(SUTTER P97)
? 如何做Ramp test;
? 多步拉制參數調節,如何精確的拉制出各種理想口徑的電極(教你玩轉拉制儀;
? 拉制儀簡單問題處理;
? 玻璃電極的拉制與拋光處理;(每人100根電極,讓你拉到手軟)
2. 溶液配制
? 內外液要求及注意事項;
? 如何調整你的內外液,以滿足實驗要求;(不拘泥于文獻)
? 內外液配方中的小竅門,讓你封接效率大大提高;
? PH計的使用;
? 露點式滲透壓儀的使用;
? 若沒有滲透壓儀,滲透壓的估算方法;
? 自己動手配制溶液(1L-2L),手把手的教你全過程;
3. 細胞培養
? 穩轉細胞系的復蘇、傳代、鋪片;
? 不同細胞系的差別;
? 因基礎不同,想細胞操作的可以每天為大家準備細胞爬片;
4. 離子通道基礎理論
? 深入講解離子通道門控特性(電壓門控、配體門控、機械門控);
? 吃透最難理解的激活、失活、去活、復活、敏化、脫敏,逐一對照實驗實例告訴你電流為何如此變化;(會反復講、反復用)
? 離子通道的其他基礎知識;
5. 膜片鉗電學理論
? 膜片鉗是如何工作的;
? 膜片鉗中重要的電容、電流、電壓、電阻;
? 膜片鉗中的實驗誤差與補償(技巧性與經驗性的干貨很多);
? 膜片鉗電學中的理論計算;(會反復的算,算到你腦仁疼)
6. 膜片鉗實際操作(重中之重)
? 顯微鏡使用,如何理解焦平面讓你快速找細胞與電極;
? 電動微操使用;
? 手動微操使用,ALA灌流,蠕動泵調節,教你如何進行精確的細胞旁給藥;
? pCLAMP使用;
? 700A/B Commander使用;
? Protocol編輯(如何編輯各種各樣的Protocol,激活、失活、復活、頻率依賴,統統推倒);
? 膜片鉗實驗中實驗記錄標準,你再也不會找不到數據;
? Nav1.5/Nav1.7通道的記錄(激活、失活、復活、給陽性藥等),做到最漂亮的Nav激活電流,你已經成功一半了;
? hERG通道的記錄(激活、失活、給藥等),你能理解hERG通道的門控特性嗎?搞懂它!!
? 在操作中遇到問題馬上講解,分析問題,解決問題,在我們培訓班中就喜歡問題;
? 反復跟理論知識相呼應;
7. 數據分析與數據處理(重中之重)
? 教你如何在線實時分析;
? Clampfit處理數據(最大值、最小值、激活、失活、原始圖、Waveform)標準化數據處理,十年后你依然知道數據是如何來的;
? Origin作圖(絕對強大,你可以專門為Origin學習而來,絕對不讓你失望);
? AI軟件修圖,做出跟文獻中一樣漂亮的圖;
? 你所得到的所有數據都要分析的,手把手教你做出漂亮的figure.
8. 論文分析
? 共同探討一篇電生理文章
? 編寫文章中所有Protocol;
9. Patchmaster講解及數據處理(因學員儀器而定)
10. Axon 200B 使用(因學員儀器而定)
11. 答疑