（A）免疫擴散法
這種方法簡便、準確，最常用。被檢的McAb樣品通常為雜交瘤細胞培養上清液，由于其中單抗的濃度較低，應先將其濃縮10-20倍左右再檢測。小鼠腹水中的單抗濃度雖很高，但也含有小鼠本身的各類Ig，它們也會與相應抗血清發生反應，使鑒定結果出現混亂，即使將腹水稀釋10-20倍后再檢測也不能完全避免上述情況的發生，因此一般不用腹水型單抗作為被檢樣品。
材料：
a、小鼠IgG及其亞類IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM、IgA的抗血清。
b、0.06mol/L巴比妥鈉-鹽酸緩沖液（PH8.6）。
c、1%瓊脂糖凝膠：1g瓊脂糖加入100ml 0.06ml/L PH8.6巴比妥鈉-鹽酸緩沖液中，隔水煮沸溶解，加0.02% NaN3防腐，4℃保存備用。
d、潔凈載玻片，打孔器（直徑3mm），濕盒，酒精燈。
方法：
a、雜交瘤細胞培養上清液的濃縮：取該上清液10ml裝入透析袋中，用線扎緊，放在小燒杯中，透析袋周圍堆置PEG6000或蔗糖或PVP（聚乙烯吡咯烷酮polyvinylpyrrolidone），放于4℃數小時，待透析袋內液體量濃縮至約0.5-1ml時，吸出，可于-20℃保存備用；也可采用吹風蒸發濃縮。
b、加熱溶化1%瓊脂糖凝膠，鋪制瓊脂糖板，每片約3ml。
c、待瓊脂凝固后，用打孔器在瓊脂板上打出梅花形的小孔（中央1孔，周圍6孔），然后封底。
d、向中央孔加入抗小鼠IgG類或亞類抗血清，周圍孔加入待檢樣品；加樣后將瓊脂板放入濕盒，置37℃水浴箱中12-24小時或4℃過夜，觀察結果。
（B） ELISA法
該法不需要將樣品濃縮，而且比免疫擴散法更快地得到結果。
材料：
a、ELISA所需用溶液同雜交瘤細胞的篩選一節。
b、酶標板。
c、山羊抗鼠Ig；兔抗小鼠Ig類及亞類特異性血清；HRP結合的山羊抗兔Ig等。
d、待檢雜交瘤細胞培養上清；陰性、陽性對照樣品。
方法一：
a、每孔加入適量的100ul山羊抗小鼠Ig，室溫2小時；洗滌液洗2次。
b、每孔加200ul封閉液，室溫作用1小時。
c、洗滌液洗2次；加100ul雜交瘤細胞培養上清，4℃過夜；設陰性、陽性對照孔。
d、洗滌4次，每孔加100ul兔抗小鼠Ig類及亞類特異性抗血清，室溫2小時。
e、洗滌4次，加100ul HRP標記的山羊抗兔Ig；室溫作用2小時。
f、洗滌后，加底物顯色，判讀結果。
g、若有HRP標記的抗小鼠Ig類及亞類試劑，則可省去e。
方法二：
a、以適宜濃度的抗原包被酶標板，100ul/孔，4℃過夜。
b、洗滌后，加入待檢的單抗樣品，100ul/孔，37℃ 1小時；設陰性、陽性對照孔。
c、洗滌后，加入HRP標記的抗小鼠類及亞類Ig的抗體試劑，100ul/孔，37℃避光顯色15分鐘；用2mol/L H2SO4終止反應后，閱讀各孔的OD490值。
C、單抗純度的鑒定
聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）、SDS-PAGE、等電點聚焦電泳（IEF）及免疫轉印分析（WB）等方法都可用于鑒定單抗的純度。PAGE、 SDS-PAGE、IEF、WB的原理和方法請參閱有關專著，這里不再贅述。
（1）單抗理化特性的鑒定
從實用意義上說，單抗對溫度和PH變化的敏感性以及單抗的親合力都是理化特性鑒定的主要項目，它們可為單抗的使用和保存提供重要依據。其中單抗親合力測定比較復雜，下面作簡要介紹。
抗體親合力是指抗體與抗原或半抗原結合的強度，其高低主要是由抗體和抗原分子的大小、抗體分子結合簇（部）和抗原決定簇之間的立體構型的合適程度決定的。親合力通常以平均內在結合常數（K）表示。
單抗親合力測定是十分重要的，它可為正確選擇不同用途的單抗提供依據。在建立各種檢測方法時，應選用高親合力的單抗，以提高敏感性和特異性，并可節省試劑。而在親和層析時，應選用親合力適中的單抗作為免疫吸附劑，因為親合力過低不易吸附，親合力過高不易洗脫。
精確測定單抗的親合力是較困難的，好在實際應用中選擇單抗時，通常只需測定各單抗的相對親合力及其高低排列次序。常用的方法有競爭ELISA、非競爭性ELISA 、間接ELISA、間接法夾心ELISA等，這里僅介紹競爭性ELISA測定單抗親和常數的方法。其步驟是：
取適宜濃度的純化抗原包被酶標板，100ul/孔，4℃過夜。洗滌后，加入封閉液（0.5% BSA-PBS，PH7.2）100ul/孔，37℃
1小時。取一定濃度的單抗，與系列倍比稀釋的抗原混合，4℃過夜，使反應達到平衡；必須注意所用抗原濃度至少要比抗體濃度高10倍以上。將平衡后的抗原抗體復合物加入酶標板孔中，100ul/孔，37℃
1小時。洗滌后，加入適宜稀釋度的HRP標記抗小鼠IgG抗體，100ul/孔，37℃
1小時。洗滌后，加入底物（OPD）溶液，100ul/孔，37℃顯色15分鐘；2mol/L
H2SO4終止反應后，于495nm波長測定各孔的吸收率（A）。按下列公式計算各單抗的親和常數（K）：
A0/（A0-A）=1+K/a0
其中A0=無抗原時A值；A=采用不同濃度抗原時的A值；a0=抗原總量；K=親和常數。
（2）單抗與相應抗原的反應性測定
單抗與相應抗原的反應性決定于它所識別的抗原表位，確定單抗針對的表位在抗原結構上的位置，是單抗特性鑒定的關鍵環節，同時，進一步分析這類表位的差別，可正確評價單抗的特異性和交叉反應性，如一些抗原為同屬不同血清型共有，甚至是科內不同屬所共有，而另一些抗原表位則是某種血清型乃至某一菌株或毒株所特有。此外，單抗的反應性往往呈現一種或幾種免疫試驗特異性，這在建株時予以測定，有利于正確使用這些單抗。
單抗反應性測定的方法很多，包括各類免疫血清學試驗、生物學試驗和免疫化學技術等，選擇何種方法依據不同的單抗特性和試驗目的而定，請參閱有關論著的詳細論述。