極限培養基的配制

試劑、試劑盒 水Na2HPO4KH2PO4NH4Cl抗生素

儀器、耗材 玻璃瓶燒瓶

實驗步驟

1.  在一個2L燒瓶中，將如下配方中的各成分加入水中， 加熱攪拌直至其溶解。

（1）5 X M9培養基，每升    

30 g Na2HPO4   

15 g KH2PO4   

5 g NH4Cl    

2.5 g NaCl    

15 mg CaCl2 （可加可不加）    

（2） 5 X M63培養基，每升

10 g (NH4)2SO4

68 g KH2PO4

2.5 mg FeSO4 ? 7H2O

用KOH調pH至7. 0

（3） 5 X A培養基，每升

5 g (NH4)2SO4

20.5 gKH2PO4

52. 5 g K2 HPO4

2.5 g 二水檸檬酸

（4） 1 X 培養基

用無菌水稀釋5X培養基，并且每升加人以下無菌溶液

1 ml 1 mol/L MgSO4 ? 7H20

10 ml  20%碳源（糖或甘油）

2.  倒入玻璃瓶中，擰松蓋子，于15 lb/in2 高壓滅菌15 min。

3.  待培養基冷卻至50°C以下（在這個溫度時，手持瓶子可感覺熱但能握得住），再加人其他補充成分和抗生素，玻璃瓶冷卻至40°C以下，蓋緊蓋子。

4.  可于室溫無限期保存。

其他

1.   如果需要還可加入以下溶液

0. 1 ml 0.5%維生素B1（硫胺素）

5 ml 20% 酪蛋白水解物（casami-no acid）（Difco）或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml