果蠅的雙因子實驗——正反交法

自由組合定律的實質是基因的分離是獨立的，而在配子中非等位基因自由組合，產生四種比例相同的配子。因此在雜種二代會出現四種表型，比例為9：3：3：1。這一實驗是利用果蠅的兩對相對性狀：長翅與殘翅、黑檀體與灰體且分別位于不同染色體上這一特征進行的長翅灰體×殘翅黑檀體的雙因子雜交實驗，旨在驗證自由組合定律。

果蠅的灰體(E)與黑檀體(e)為一對相對性狀,決定這對性狀的基因位于第Ⅲ染色體上;長翅(Vg)與殘翅(vg)為另一對相對性狀,決定這對性狀的基因位于第Ⅱ染色體上。

黑腹果蠅 ( Drosophila melanogaster ) 的兩個品系 : 灰體殘翅 ( EEvgvg) 黑檀體長翅 ( eeVgV g)

乙醚玉米粉瓊脂紅糖酵母粉丙酸

立體解剖鏡恒溫培養箱天平培養瓶及麻醉瓶毛筆及白瓷板

1.選灰體殘翅果蠅為母本,黑檀體長翅為父本(反交也可,但因殘翅果蠅不能飛,只能爬行,用做母本比較好)。雌蠅一定要選處女蠅,可在實驗前2～3d陸續收集,雌、雄個體分開培養 , 數目多少根據需要而定。

2. 首先把灰體殘翅處女蠅倒出麻醉 , 挑 5 只移到水平放置的雜交瓶中 , 再把 黑檀體長翅倒出麻醉 , 挑選 5 只雄蠅 , 移到上述雜交瓶中。 等 雜交 親本在雜交 瓶中全部蘇 醒后 ,將雜交瓶直立 , 并移入 25℃ 溫箱中培養。 注意貼好標簽 ( 寫明親本基因型、交配方式、雜交日期、實驗者姓名)。

3. 7d 后 , 釋放雜交親本。

4. 再過 4～5d, F1 成蠅開始出現 , 觀察 F1性狀 , 連續檢查 2～3d, 或在釋放親本7d后集中觀察。

5. 選取 5～10 對 F1 雌、雄果蠅 , 移入一 新培養瓶 ( 這里不需用處女蠅) , 置 25℃ 溫箱中培養。

6. 7d 后 , 釋放 F1 親本。

7.再過4～5d,F2成蠅出現,開始觀察。可連續統計7～8d。被統計過的果蠅倒入水槽沖掉。

8.觀察并統計F1代的表型及個體數,分析相對性狀間的顯隱性關系。觀察并統計F2代的表型及各種表型的個體數,特別要注意新性狀組合個體的出現。計算不同表型個體數的比例,確定這兩對基因的遺傳規律。