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  • 發布時間:2019-11-18 15:38 原文鏈接: 染色體結構變異實驗

    實驗方法原理:染色體結構變異主要有缺失、重復、倒位、易位四種。其發生過程是由于同源染色體或非同源染色體之間發生斷裂,然后發生錯誤重接的結果。各種結構變異的雜合體,在細胞分裂過程中常常表現不正常的細胞學行為,可以進行細胞學鑒定。在減數分裂過程粗線期,可以觀察到缺失雜合體的“缺失環”,重復雜合體的染色體突出的環或瘤,倒位雜合體的“倒位圈”或者后期的染色體橋,易位雜合體的“十字形”聯合或者終變期“四體環”“四體鏈”“8字形環”。在有絲分裂細胞中可見到后期的染色體橋,染色體斷片,以及間期的細胞核顯出現“微核”等。

    染色體結構變異一般可導致花粉和胚珠的部分不育,或者半不育,產生遺傳性狀的變異,以及假顯性,假連鎖、劑量效應、位置效應等等改變基因連鎖關系遺傳后果,嚴重的可造成個體死亡。通過染色體行為觀察和遺傳效應實驗相互印證,鑒別染色體結構變異的類型。

    實驗材料:蠶豆

    試劑、試劑盒:

    醋酸洋紅                                                                 

    改良苯酚品紅                                                                  

    無水酒精                                                                  

    70%酒精                                                                  

    鹽酸 

    儀器、耗材:

    顯微鏡                                                                  

    培養箱                                                                  

    分析天平                                                                 

    水浴鍋                                                                  

    酒精燈                                                                  

    剪刀                                                                 

    鑷子                                                                  

    解剖針                                                                  

    載玻片                                                                  

    蓋玻片                                                                  

    濾紙                                                                 

    鉛筆                                                                 

    標簽紙                                                                 

    膠水 

    實驗步驟:

    一、材料和器材

    1、實驗材料:

    蠶豆(vicia faba, 2n=12)干種子

    2、實驗儀器及用具:

    顯微鏡、培養箱、分析天平、水浴鍋、酒精燈、剪刀、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、濾紙、鉛筆、標簽紙、膠水

    3、藥品和試劑:

    醋酸洋紅、改良苯酚品紅、無水酒精、70%酒精、1N鹽酸、

    二、實驗方法和步驟

    1、材料準備

    選購具強生活力的蠶豆干種子,經45格倫鈷60照射(或用植物誘變劑等)處理后。浸種24小時,然后置搪瓷盤上攤平催芽,上蓋三層紗布保溫,于20℃上培養,待根長1~2厘米時,切取頂端根尖5毫米左右于卡諾氏固定液0.5小時,然后換入70%酒精保存備用。

    2、解離

    取出經固定的備用根尖,切取具分生組織部分約1~2毫米,(去除根冠和伸長區細胞)置1NHCl中解離10-20分鐘。然后用蒸餾水洗盡材料上鹽酸,準備制片和染色

    3、染色制片

    取一枚經解離的蠶豆根尖,置載玻片正當中,兩片載玻片呈十字形對壓,然后揭開,在有材料的部位各滴上一小滴染色(醋酸洋紅或改良苯酚品紅),再用蓋玻片壓片(見實驗一)。

    4、鏡檢:

    觀察有絲分裂細胞后期的染色體橋和染色體斷片,間期細胞的微核。


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