染色末端的清潔純化實驗

乙醇 洗脫上樣液

磁性分離裝置 平板夾 平板架 測序反應純化系統

一、材料

1. 緩沖液、溶液和試劑

用于測序的膠洗脫/上樣液 (見表 9-4)

90% 乙酵洗滌液

2. 特殊設備

MagnaBotⅡ磁性分離裝置（Promega)

平板夾 96(Promega)

平板架（Promega)

3. 其他

WizardMagneSil 測序反應純化系統（Promega; 包括 MagneSilGREEN[順磁性顆粒])

96 孔板

二、方法



1. 將 96 孔板裝到平板夾 96 中 [圖 9-10(a)、（b)]。

2. 使用平板架 [圖 9-10(c)] 將平板放置在自動機械工作臺上。

3. 劇烈振蕩瓶以重懸 MagneSil 顆粒，每 20ul 測序反應體系中加入 180ulMagneSil顆粒。

4. 室溫下溫育 5 min, 期間分別在 0、2.5 min 和 5 min 時進行抽吸混合。

5. 將板放到 MagnaBotⅡ磁性分離裝置 [圖 9-10(d)] 上以捕獲顆粒。

6. 移棄液體，避免損失任何顆粒。

7. 從 MagnaBotⅡ設備上取出板，置于平板架上。

8. 每個樣品中加入 100ul90% 的乙醇。

9. 室溫下溫育 5 min, 期間分別在 0、2.5 min 和 5 min 時進行抽吸混合。

10. 將板放到 MagnaBotnⅡ磁性分離裝置上以捕獲顆粒。

11. 移棄液體，避免損失任何顆粒。

12. 重復步驟 7~11 使總洗滌次數達到 2 次。

13. 顆粒在室溫下風干約 10 min。

14. 加適量洗脫/上樣液（表 9-4)。

15. 室溫下溫育 1~2 min。

16. 將板放到 MagnaBotnⅡ磁性分離裝置上以捕獲顆粒。

17. 將已純化的測序反應體系轉移到干凈的 96 孔板，小心以避免損失任何顆粒。