柱層析的注意事項有哪些

1 裝柱。 柱子下面的活塞一定不要涂潤滑劑，會被淋洗劑帶到產品中的，可以采用四氟節門的。 干法和濕法裝柱覺得沒什么區別，只要能把柱子裝實就行。裝完的柱子應該要適度的緊 密（太密了淋洗劑走的太慢），一定要均勻（不然樣品就會從一側斜著下來）。書中寫 的都是不能見到氣泡，我覺得在大多數情況下有些小氣泡沒太大的影響，一加壓氣泡就 全下來了。當然假如你裝的柱子總是有氣泡就說明需要多練習了。但是柱子更忌諱的是 開裂，甭管豎的還是橫的，都會影響分離效果，甚至作廢！ 2 加樣。 用少量的溶劑溶樣品加樣，加完后將下面的活塞打開，待溶劑層下降至石英砂面時，再 加少量的低極性溶劑，然后俅蚩釗绱肆餃危話閌⑸熬突臼前咨牧恕? 加入淋洗劑，一開始不要加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有一段距離（2～4cm就夠了） ，再加壓，這樣避免了溶劑（如二氯甲烷等）夾帶樣品快速下行。 3 淋洗劑的選擇。 感覺上要使所需點在rf0.2～0.3左右的比較好。不要認為在板上爬高了分的比較開，過 柱子就用那種極性，假如rf在0.6，即使相差0.2也不輕易在柱子上分開，因為柱子是一 個多次爬板的狀態，可以通過公式的比較：0.6/0.8一次的分離度，肯定不如（0.2/0.3 ）的三次方或四次方大。 4 樣品的收集。 用硅膠作固定相過柱子的原理是一個吸附與解吸的平衡。所以假如樣品與硅膠的吸附比 較強的話，就不輕易流出。這樣就會發生，后面的點先出，而前面的點后出。這時可以 采用氧化鋁作固定相。 另外，收集的試管大小要以樣品量而定，非凡是小量樣品，假如用大試管，可能一根就 收到了三個樣品，wuwu。假如都用小試管那工作量又太大。 5 最后的處理。 柱分后的產品，由于使用了大量的溶劑，其中的雜質也會累積到產品中，所以假如想送 分析，最好用少量的溶劑洗滌一下，因為大部分的雜質是溶在溶劑里的，一洗基本就沒 了，必要時進行重結晶。 另外，再過柱的時候，有時會出現氣泡，一是 和使用的溶劑有關，假如是易揮發的溶劑，如乙醚、二氯甲烷等，在 室溫稍高的情況下，很輕易出現這種現象，因此，在室溫高的時候， 可以選擇沸點較高，揮發相對小的溶劑。還有，使用混合溶劑時，使用 的兩種溶劑的沸點應該相差不大，如：乙酸乙酯和石油醚(60~90),而 乙醚卻要選擇30－60的石油醚。二是：不論是用帶砂板的還是塞棉花的， 在裝柱之前，都要將空氣用加壓的方法將空氣排干，這樣就可避免柱中有 空氣！過柱子需要耐心，不要著急。