梅毒的實驗室檢測方法（一）

在梅毒的診斷治療中，梅毒的實驗室檢測結果起到了很重要的作用，具有決定性的意義，下面就梅毒的檢測方法做一個簡單的介紹。

一、梅毒常用的檢測方法

梅毒一般常用的檢測方法是兩種：病原學檢測，血清學檢測。

兩種方法檢測的標志物不同，病原學檢測的直接檢測梅毒螺旋體，而血清學檢測是檢測血液或者組織液中的梅毒抗體；兩種方法各有優缺點，針對不同的感染情況，采用最合適的檢測方法，就能夠起到及時診斷治療，對治療的時機和效果有著重要的意義。

二、病原學檢測

病原學檢測是直接檢測組織液中的梅毒螺旋體，是一種小而纖細的螺旋狀微生物，因其透明不易染色，故稱為蒼白螺旋體，長度為8μm～20μm，平均8μm～10μm，直徑<0.2μm,有6～12個螺旋。

梅毒螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，也通過羊膜穿刺術獲得孕婦的羊水作暗視野顯微鏡檢查，對先天梅毒具有診斷價值。

原理：一期、二期梅毒時，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結穿刺術得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發出亮光，從而可根據其特殊形態和運動方式進行檢測。

檢測主要有幾種方法：暗視顯微鏡檢查，鍍銀染色法，直接熒光法。用暗視野檢查法檢查病損內的梅毒螺旋體，這是一種最可靠的簡單而常用的方法；免疫熒光檢查法是一種可區別病損中的螺旋體是梅毒螺旋體或其他非致病螺旋體的方法，此法同樣具有特異性；而銀染色法是一種可顯示內臟器官及皮膚損害中螺旋體的方法，但腐生螺旋體也可染色，因此是非特異性染色法。一般常用的是采用暗視顯微鏡檢查。

暗視野映光檢查是采用一個特殊的聚光器，中央為黑漆所遮蔽，光線只可從其圓周邊緣斜射到載玻片上。倘若斜射光線遇到載玻片上的物體，如螺旋體等，由于菌體和周圍液體折光率不同，引起散射的光線可通過鏡筒達到觀察者。因此，物體在暗視野內發光顯現。

暗視野顯微鏡檢查、鍍銀染色和熒光抗梅毒螺旋體單克隆抗體等檢查方法，直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、方便、易操作的特點。暗視野顯微鏡檢查已被世界衛生組織指定為性病實驗室必備項目之一。

螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對于患者的早期診斷、及時治療、預后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。

但如未檢測出梅毒螺旋體，也并不能排除患梅毒的可能性，可能是由取材不當或皮損處螺旋體數量不足，或患者使用過抗菌素，損害已接近自然消退等原因引起。可讓患者復查及進行血清學檢查。。

三、血清學檢測

梅毒的血清學檢測是梅毒診斷和抗生素治療后療效評估的主要手段，目前大部分醫療機構基本上都是采用此種方法對梅毒進行診斷治療。

梅毒的抗體檢測分為非梅毒螺旋體抗原血清學試驗和梅毒螺旋體抗原血清學試驗兩種。

1、非梅毒螺旋體抗原血清學試驗：主要有性病研究實驗室試驗（VDRL），不加熱血清反應素試驗(USR)，快速血漿反應素環狀卡片試驗(RPR)甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）。

試驗的原理：梅毒螺旋體一旦感染人體，宿主可對螺旋體表面的脂質作出免疫應答，產生抗類脂抗原的抗體（非特異性抗體），試驗試劑的基本成分是心磷脂、卵磷脂和膽固醇，抗原抗體結合形成復合物，凝集成網狀沉淀顆粒被肉眼所見。

VDSL：二十世紀50、60年代最為常用的梅毒血清學試驗，所用的抗原是從牛心中提取的心磷脂和從雞蛋黃中提取的卵磷脂及膽固醇等有效成分，梅毒螺旋體在破壞機體組織的過程中，體內釋放一種心磷脂抗原，這種抗原可**機體產生相應的抗體即反應素，其與牛心中提取的心磷脂在體外可產生免疫結合反應，試驗中所用的卵磷脂的作用是加強心磷脂的抗原性，膽固醇可增強抗原的敏感性。

此方法是唯一推薦檢測腦脊液反應素的方法，用于神經梅毒腦脊液檢測特異性高，檢測陽性可以作為神經梅毒確診依據，但敏感性較低，即檢測陰性不能排除神經梅毒。

此試驗有幾個明顯的缺點，抗原需要每天配制；血清標本要加熱滅活處理；需在顯微鏡下觀察結果。因此，后來又推出了改良的USR和RPR等方法。

USR：對VDRL抗原進行了改良，其將VDRL抗原用稀釋液稀釋后，再將該抗原懸液離心，然后在沉淀物中加入含有EDTA-Na2、氯化膽堿和防腐劑的一定量的緩沖液，EDTA可使抗原半年內不變性，氯化膽堿對補體有化學滅活作用，從而使用時無需每天配制抗原及血清加熱滅活處理。

RPR:是在上述USR抗原的基礎上加入一定量特制的活性炭顆粒，實驗在特制的白色紙片卡上進行，從而使得抗原抗體反應在白色底板上出現黑色的凝集顆粒而可用肉眼觀察，結果容易判斷,直接用肉眼而不需要用顯微鏡觀測結果。

TRUST：該方法是在抗原試劑中加入特制的染料甲苯胺紅,由于甲苯胺紅是化學染料，顆粒均勻，生產的批間差異小，結果易于觀察。

TRUST是目前最為常用的梅毒篩查方法。

臨床意義：非梅毒螺旋體抗原血清試驗方法簡單、快速、敏感性和特異性較好，可作為梅毒篩查試驗。因治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復發或再感染的指征；結合梅毒螺旋體抗原血清學試驗，可以鑒別梅毒現癥感染和既往感染。

幾種方法的敏感性和特異性都基本相似。

非梅毒螺旋體抗原血清試驗敏感性和特異性