將植物細胞A與植物細胞B用纖維素酶和果膠酶處理，得到不含細胞壁的原生質體A和原生質體B，運用物理方法或是化學方法誘導融合，形成雜種細胞，再利用植物細胞培養技術將雜種細胞培養成雜種植物體。
①雜交時間：植物細胞雜交是從細胞融合開始，到培育成的新植物體結束。
a.原生質體制備：用酶解法去除細胞壁（纖維素酶和果膠酶）
b.原生質體融合：膜融合（高鈣、高pH誘導融合）、核融合（雜種細胞第一次有絲分裂時融合）
PEG誘導融合的特點：其優點是融合成本低，勿需特殊設備；融合子產生的異核率較
高；融合過程不受物種限制。其缺點是融合過程繁瑣，PEG可能對細胞有毒害。
PEG的作用機理： Kao等認為，由于PEG分子具有輕微的負極性，故可以與具有正極
性基團的水、蛋白質和碳水化合物等形成H鍵，從而在原生質體之間形成分子橋，其
結果是使原生質體發生粘連進而促使原生質體的融合；另外，PEG能增加類脂膜的流動
性，也使原生質體的核、細胞器發生融合成為可能。