實驗方法原理
植物多倍體是指每個細胞內染色體組有三套以上的植物。人工誘發多倍體的方法有很多,本實驗利用秋水仙素抑制紡綞絲的形成,使得染色體復制后不能向兩極移動,同時細胞也不分裂,從而形成多倍體的原理,用適當濃度的秋水仙素處理洋蔥或大蒜根尖,待根尖膨大后制片觀察,可發現多倍體細胞。
實驗材料 大蒜洋蔥玉米種子植物幼苗
試劑、試劑盒 秋水仙素
儀器、耗材 顯微鏡恒溫培養箱 恒溫水浴鍋 鑷子 載玻片及蓋玻片
實驗步驟
1.種子催芽:將黑麥或大麥種子用自來水洗凈并浸泡半小時,然后轉入有浸潤吸水紙的平皿中,于25℃培養箱中催芽36~48h。
2.秋水仙素處理:種子萌發至根長0.5~1.0cm,留下發芽的種子,用水洗凈,吸干水,加入0.02%秋水仙素溶液,使萌發出的根尖浸泡在秋水仙素溶液中。蓋上平皿,置25℃溫箱中處理24h。
3.根尖的觀察及固定:經處理之后,根尖膨大,形如鼓棰。取此種根尖,置青霉素瓶中,用甲醇∶冰醋酸(3∶1)固定液固定6h后棄去固定液,繼續下列步驟或加入70%酒精于4℃冰箱中保存。
4.根尖處理及壓片:棄去固定液或酒精,加入60℃預熱的1mol/L鹽酸,于60℃水浴鍋中解離10min。棄去鹽酸,用自來水將根尖反復清洗幾遍,以徹底洗凈鹽酸。用石炭酸品紅染色后,即可進行壓片觀察,鑒別根尖細胞染色體加倍情況。