植物組織水勢的測定（小液流法）

一、 原理

將植物組織分別放在一系列濃度遞增的溶液中，當找到某一濃度的溶液與植物組織之間水分保持動態平衡時，則可認為此植物組織的水勢等于該溶液的水勢。因溶液的濃度是已知的，可以根據公式算出其滲透壓，取其負值，為溶液的滲透勢（ψπ），即代表植物的水勢（ψw）（waterpotential）。

ψw＝ψπ＝－P＝－CRT（大氣壓）

二、材料、儀器設備及試劑

（一）材料：小白菜、菠菜、油菜或其它作物葉片

（二）儀器設備：1.帶塞青霉素小瓶12個；2.帶有橡皮管的注射針頭；3.鑷子；4.打孔器5.培養皿。

（三）試劑：1.0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol/L蔗糖溶液；2.甲烯藍粉末。

三、實驗步驟

（一）取干燥潔凈的青霉素瓶6個為甲組，各瓶中分別加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液約4ml（約為青霉素瓶的2／3處），另取6個干燥潔凈的青霉素瓶為乙組，各瓶中分別加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液1ml和微量甲烯藍粉末著色，上述各瓶加標簽注明濃度。

（二）取待測樣品的功能葉數片，用打孔器打取小圓片約50片，放至培養皿中，混合均勻。用鑷子分別夾入5～8個小圓片到盛有不同濃度的甲烯藍蔗糖溶液的青霉素瓶中（乙組）。蓋上瓶塞，并使葉圓片全部浸沒于溶液中。放置約30～60min，為加速水分平衡，應經常搖動小瓶。（三）經一定時間后，用注射針頭吸取乙組各瓶藍色糖液少許，將針頭插入對應濃度甲組青霉素瓶溶液中部，小心地放出少量液流，觀察藍色液流的升降動向。（每次測定均要用待測濃度的甲烯藍蔗糖溶液清洗幾次注射針頭）。如此方法檢查各瓶中液流的升降動向。若液流上升，說明浸過小圓片的蔗糖溶液濃度變小（即植物組織失水）；表明葉片組織的水勢高于該濃度糖溶液的滲透勢；如果藍色液流下降則說明葉片組織的水勢低于該糖溶液的滲透勢，若藍色液流靜止不動，則說明葉片組織的水勢等于該糖溶液的滲透勢，此糖溶液的濃度即為葉片組織的等滲濃度

四、結果計算

將求得的等滲濃度值代入如下公式：

ψw＝ψπ＝－CRTi×1.013×0.1。式中：ψw＝植物組織的水勢（單位：Mpa）ψπ＝溶液的滲透勢C＝等滲濃度（mol/L）R＝氣體常數（0.008314MPa/L/mol/K）T＝絕對溫度i＝解離系數（蔗糖＝1，CaCl2＝2.60）1大氣壓＝1.013＝0.1MPa。

【注意事項】

1.1所取材料在植株上的部位要一致，打取葉圓片要避開主脈和傷口。

2.2取材以及打取葉圓片的過程操作要迅速，以免失水。

3.3帶有結晶水的甲烯藍不易溶于CaCl2溶液，可在100℃下烘干成無水甲烯藍粉末使用。