實驗方法原理 植物體內可溶性糖包括還原糖和非還原糖(主要是蔗糖)。因此測定蔗糖時,須先用鹽酸將其水解為還原糖,再測定水解后的總還原糖含量,然后從總還原糖含量減去水解前還原糖含量即為蔗糖含量。
實驗材料 馬鈴薯水果
試劑、試劑盒 鹽酸溶液氫氧化鈉溶液酚酞指示劑
儀器、耗材 分光光度計電子分析天平恒溫水浴鍋25 ml刻度試管50 ml容量瓶100 ml三角瓶試管架移液管移液管架洗耳球玻棒
實驗步驟
1.葡萄糖標準曲線制作與上述還原糖含量測定相同。
2.樣品中蔗糖的水解
精確吸取上述測定還原糖含量的糖分提取液10 ml置于100 ml三角瓶中,加6mol·L-1鹽酸10 ml,搖勻,在沸水浴中加熱10min,冷卻后加入酚酞指示劑一滴,以10﹪氫氧化鈉中和至溶液呈微紅色,然后將提取液轉入50 ml容量瓶中加蒸餾水稀釋定容至刻度,待測。
3.樣品中總還原糖的測定
取4 支25 ml刻度試管,編號,其中3支(三個重復)分別加入待測液2 ml,1支空白管加
2 ml蒸餾水,然后各管再加入DNS試劑1.5 ml,搖勻,混合液在沸水浴中加熱5min,然后用自來水冷卻,各加入21.5 ml蒸餾水使總體積為25 ml,搖勻,在520nm波長處測定吸光度(A)值。
其他
根據待測液的吸光度值從上述標準曲線查中出其相應的還原糖含量,然后按下公式計算出樣品中可溶性糖總量和蔗糖總量的百分率。
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