1、與吡咯系列抗真菌劑（伊曲康唑）合用，增加肌肉神經系統的副作用。如發現有副作用，應進行減量、暫停或停藥等適當處理。伊曲康唑有阻礙肝細胞色素P-4503A的作用，長春新堿通過肝細胞染色素P-4503A代謝，合用可使長春新堿代謝受抑制。
2、與苯妥英鈉合用，降低苯妥英鈉吸收，或使代謝亢進。
3、與含鉑的抗亞、惡性腫瘤劑合用，可能增強第8對腦神經障礙。
4、與L-天冬酰胺酶合用，可能增強神經系統及血液系統的障礙。為將毒性控制到最小，可將硫酸長春新堿在L-天冬酰胺酶給藥前12-24小時以前使用。
5、長春新堿被廣泛的應用于癌癥的化療方案，但由于化療存在著比較嚴重的骨髓抑制，腸胃道反應和肝腎損傷等，故需配合同步服用補硒劑，利用硒的作用輔助控制病情、修復腸胃的機體功能，并提升免疫，同時能刺激骨髓，恢復骨髓的造血功能，另外更能提升細胞對化學藥物毒性的耐受性，減少副作用，增強化療效果。