本法系依據4-氨基安替比林、鐵氰化鉀在堿性條件下與間甲酚反應生成一種紅色物質，用比色法測定供試品中間甲酚含量。
測定法
精密量取一定體積的供試品，置試管中，定量稀釋50倍，即為供試品溶液。量取供試品溶液1.0ml，加水5.0ml，混勻，依次加pH 9.8緩沖液（稱取無水碳酸鈉6.36g、碳酸氫鈉3.36g，加水溶解并稀釋至800ml，用1mol/L鹽酸調節pH值至9.8后，再加水至1000ml）、0.3% 4-氨基安替比林溶液、1.2%鐵氰化鉀溶液及1mol/L磷酸二氫鉀溶液各1.0ml，混勻，于室溫避光放置10分鐘，照紫外-可見分光光度法（通則0401），在波長510nm處測定吸光度。
精密量取間甲酚對照品溶液（取間甲酚適量，精密稱定，置量瓶中，加水溶解并稀釋至每1ml含10μg）1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml，分別置試管中，加水補至6.0ml，自本法前述依次加pH 9.8緩沖液”起，同法操作，測定各管的吸光度。
以間甲酚對照品溶液的系列濃度對其相應的吸光度作直線回歸，將供試品溶液的吸光度代入直線回歸方程，得供試品的間甲酚含量（mg/ml）。