1)測定原理
在硫酸介質中環已基氨基磺酸鈉與亞硝酸鈉反應,生成環己醇亞硝酸酯,利用氣相色譜法進行定性和定量。
2)試劑
①環己基氨基磺酸鈉標準溶液(含環己基氨基磺酸鈉,98%) 精確稱取1.0000g環基氨基磺酸鈉,加水溶解并定容至100mL,此溶液環已基氨基磺酸鈉的濃度為10.00mg/mL。
②100g/L硫酸溶液 稱取50g濃硫酸,用水定容至500mL。
③50g/L亞硝酸鈉溶液 稱取25g亞硝酸鈉,用水定容至500mL。
④正己烷。
⑤氯化鈉。
⑥色譜硅膠(或海砂)。
3)儀器
氣相色譜儀(帶氫火焰離子化檢測器);離心機;10μL微量進樣器;漩渦混合器。
4)色譜條件
①色譜柱 長2m,內徑3mm,U形不銹鋼柱。
②固定相 Chromosorb W AW DMCS80-100目,涂以10%SE-30。
③測定條件 柱溫80℃;氣化溫度150℃;檢測溫度150℃。流速:氮氣40mL/min,氫氣30mL/min,空氣300mL/min。
5)分析步驟
(1)試樣處理
①液體樣品搖勻后直接稱取。含二氧化碳的樣品先加熱除去;含酒精的樣品加40g/L氫氧化鈉溶液調制堿性,于沸水浴中加熱除去,制成試樣。
②固體樣品涼果、蜜餞類樣品將其剪碎制成試樣。
(2)試樣制備
①液體試樣 稱取20.0g試樣于100mL帶塞比色管,置冰浴中。
②固體試樣 稱取2.0g已剪碎的試樣于研缽中加少許色譜硅膠(或海砂)研磨至呈干粉狀,經漏斗倒入100mL容量瓶中,加水沖洗研缽,并將洗液一并轉移至容量瓶中,加水至刻度,不時搖動,1h后過濾,即得試料,準確吸取20mL于100mL帶塞比色管,置冰浴中。
(3)測定
①標準曲線的制備:準確吸取1.00mL環己基氨基磺酸鈉標準溶液于100mL帶塞比色管中,加水20mL,置冰浴中,加入5mL50g/亞硝酸鈉溶液、5mL100g/L硫酸溶液,搖勻,在冰浴中放置30min,并經常搖動。然后準確加入10mL正已烷、5g氯化鈉,搖勻后置漩渦混合器上振動1min(或振搖80次),待靜置分層后吸出己烷層于10mL帶塞離心管中進行離心分離。每毫升己烷提取液相當于1mg環己基氨基磺酸鈉。將標準提取液進樣1～5μL于氣相色譜儀中,根據響應值繪制標準曲線。
②樣品管加入5mL50g/L亞硝酸鈉溶液、5mL100g/L硫酸溶液,搖勻,在冰浴中放置30min,并經常搖動,然后準確加入10mL正己烷、5g氯化鈉,搖勻后置漩渦混合器上振動1min(或振搖80次),待靜置分層后吸出已烷層于10mL帶塞離心管中進行離心分離。然后將試樣提取液同樣進樣1～5μL,測得響應值,從標準線圖中查出相應含量。
6)結果計算
式中 X——樣品中環已基氨基磺酸鈉的含量,g/kg;
m——樣品質量,g;
V——進樣體積,μL;
10——正已烷加入量,mL;
A——測定用試料中環己基氨基磺酸鈉的量,μg。
結果的表述:報告算術平均值小數點后保留兩位。