氣相色譜法測定冰片含量

摘要：采用正十二烷作內標，選用OV?101的石英玻璃毛細管柱，建立了某藥廠中成藥膠囊中冰片含量的氣相色譜測定方法。與張亮(1994)、劉柏年(1984)工作相比，不僅大大節約了分析時間，而且分離效果更佳，測定結果的重現性好，標準偏差S=0.40，平均回收率高達99.0%，內標物與冰片的濃度比為1∶0.3～1∶1.5時峰面積與濃度成線性關系，相關系數r=0.9997。
引言：在用文獻［1］［2］的方法測定某藥廠中成藥中的冰片含量時，考慮到原方法的分析時間較長所帶來的不便，因此根據冰片(2-莰醇)的極性，選擇了弱極性的色譜柱(OV-101)來替代原方法中的中等極性色譜柱(PEG-20M或PEG-2M)，同時將內標物選為正十二烷(原方法為正辛烷或正十七烷)，結果冰片出峰時間提前，內標峰與冰片峰不僅能完全分開，而且相距僅1分鐘左右，6分鐘即可完成一次分析測定。而原方法中冰片峰與內標峰間隔約7分鐘，分析時間長達20分鐘。經過多次實驗證明，改進后的方法比原方法快捷，而且分離效果更佳。在本文選定的色譜分析條件下，內標物與冰片濃度比為1∶0.3～1∶1.5時峰面積與濃度線性關系，所繪制的標準曲線相關性好，相關系數為0.9997，平均回收率為99.0%，標準偏差為0.4039。因而該方法有較好的精密度和準確度，而且也節約了分析時間。
1、實驗部分
1.1、儀器、試劑及測試條件  意大利FISONS公司GC8340-00型氣相色譜儀 色譜柱：OV-101石英玻璃毛細管柱，柱長25m，柱徑0.32mm 檢測器：FID，靈敏度103冰片：化學對照品(中國藥品生物制品檢定所)正十二烷：色譜純(上海試劑一廠)內標溶液：將52.5mg正十二烷溶于25ml醋酸乙酯中搖勻備用氣流：N250kPa，65ml/min；H235ml/min；Air300ml/min 溫度：柱溫120℃；進樣口180℃；檢測器：220℃
1.2相對校正因子的測定及線性范圍的確定  精確稱取冰片20.18mg、34.91mg、47.13mg、59.00mg、73.81mg于25ml容量瓶中，各精確加入正十二烷約52.50mg作內標，用醋酸乙酯稀釋至刻度，溶解后搖勻備用。各精確吸取上述溶液[WTBZ]1ul按1.1的條件測定，繪制標準曲線回歸直線方程：y=0.7469x+0.0266 相關系數：r=0.9997 注：WI=內標物質量Ws=樣品質量 AI=內標峰面積As=樣品峰面積，當內標物與冰片濃度比為1∶0.3～1∶1.5時峰面積與濃度成線性關系。由上述1.2配制的五個標準溶液(各加入52.50mg內標)所測定的氣相色譜圖，分別求出相對校正因子及其平均值，結果列于表1。冰片的相對校正因子根據下式計算：Ms=樣品濃度 As=樣品峰面積 Mi=內標濃度 Ai=內標峰面積 表1冰片的相對校正因子測定值 相對校正因子RSD(%)

1.3樣品溶液的制備及測定 將藥丸研細，精確稱取約400mg于10ml具塞玻管中，再準確加入內標溶液3ml，振搖15秒后在離心機上分離，分出的上層清液轉入一具塞容量瓶中備用。另加5ml蒸餾水于上述含沉淀的玻管中，于40℃水浴上加熱15分鐘，再精確加入內標溶液3ml，振搖15秒后，離心分離，分出的上層清液也轉入上述容量瓶中備用。最后再精確加入內標溶液3ml于含沉淀玻管中，同法萃取后將分出的上層清液與前兩次的合并得樣品溶液。精確吸取1ul樣品溶液作氣相色譜分析。氣相色譜圖：冰片的右旋峰、左旋峰、內標峰的保留時間分別為4.20min、4.59min、5.32min。
2、結果與討論
2.1色譜柱的選擇根據冰片(2―莰醇)的極性，如選擇文獻中的中等極性柱(固定液為)PEG-20M或PEG-2M，則冰片與固定液的相互作用較大，因此在柱中滯留的時間長，從而使分析時間較長。本文改用固定液為OV-101的弱極性柱，可使冰片在進樣4分鐘之后即可出峰，比文獻提前了8分鐘，并且冰片的左、右旋峰能完全分離，證明柱分離效果良好。
2.2內標的選擇：通過多次實驗，發現在1.1測試條件下，正十二烷出峰時間為5.30min左右，與冰片峰相隔最近，而正十四烷、正十七烷出峰時間均為6分鐘以上，因此正十二烷出峰位置最佳，不僅能與冰片峰完全分離，而且與冰片峰最接近，是理想的內標物。
3、結論

      從繪制的標準曲線以及回收率和精密度數據來看，本方法準確、穩定、重現性好，而且快速、實用，完全能夠滿足廠家對中成藥中冰片含量分析的要求。