氣質聯用技術檢測對甲苯磺酸酯類雜質

　　對甲苯磺酸烷基酯，如對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯，是對甲苯磺酸與甲醇，乙醇，或其它低級醇形成的酯。對甲苯磺酸烷基酯會被視為潛在基因毒性雜質，這些物質可與DNA發生烷基化反應，從而可能成為引發癌癥的誘因。由于拉帕替尼在生產過程中使用了對甲苯磺酸、甲醇、乙醇和異丙醇，反應過程中易生成對甲苯磺酸甲酯，對甲苯磺酸乙酯，對甲苯磺酸異丙酯。本試驗采用氣相色譜質譜聯用技術檢測檢測這三種雜質。 
　　1 儀器 
　　Agilent6890-5973GC/MS氣質聯用儀。 
　　2 對照品 
　　對甲苯磺酸甲酯（分析純），對甲苯磺酸乙酯（分析純），對甲苯磺酸異丙酯（分析純），對甲苯磺酸丁酯（分析純）。 
　　3 色譜條件 
　　色譜柱：以6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管柱（長：30m，內徑：0.32mm，膜厚：1μm）。 
　　載氣：氦氣。 
　　流速：2.0mL/min。 
　　進樣口溫度：220℃。 
　　頂空條件：平衡溫度60℃；平衡時間30min。 
　　柱程序升溫：初始柱溫40℃，保持3分鐘，以每分鐘5℃的速度升到220℃，保持5分鐘。 
　　質譜檢測參數：電子轟擊（EI）離子源，電離能量70eV，離子源溫度230℃，SIM掃描模式，分別選擇質荷比（m/z）為142、156、170、184的離子進行檢測。 
　　4 溶液配制 
　　稀釋劑：水―乙腈（50∶50）。 
　　溶液A：稱取120g碘化鈉，60mg無水硫代硫酸鈉溶于少量水中，再用水定容至100mL量瓶中。 
　　內標液：精密量取100μL對甲苯磺酸正丁酯用稀釋劑稀釋至100mL，搖勻，精密量取該液20μL用稀釋劑稀釋至100.0mL，搖勻即得。 
　　供試品溶液：取本品適量（約相當于拉帕替尼25mg），精密稱定，置于20mL頂空瓶，加入0.50mL溶液A和0.50mL內標液，密封，搖勻。 
　　對照品溶液（a）：分別精密稱取400mg的對甲苯磺酸甲酯、1250.0mg的對甲苯磺酸乙酯和18.0mg的對甲苯磺酸異丙酯，用甲苯稀釋至10.0mL。精密量取50μL該液用內標液稀釋定容至25.0mL。 
　　對照品溶液（b）：精密量取100μL對照品溶液（a）用內標液稀釋至100mL，取1.0mL該液和1.0mL溶液A于20mL頂空瓶中，密封，搖勻。 
　　對照品溶液（c）：精密量取500μl對照品溶液（a）用內標液稀釋至20.0mL，取1.0mL該液和1.0mL溶液A于20mL頂空瓶中，密封，搖勻。 
　　5 方法驗證 
　　（1）系統適用性考察 
　　①靈敏度試驗。取對照品溶液（b）進樣，記錄色譜圖。結果各目標峰的信噪比均遠大于10。 
　　②進樣重復性試驗。取對照品溶液（c）5份，分別進樣檢測，各溶劑峰面積與內標物峰面積比值的RSD均小于5.0%，各溶劑峰保留時間均小于1.0%。 
　　（2）專屬性 
　　分別對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯、對甲苯磺酸異丙酯和對甲苯磺酸正丁酯適量，制得對照品溶液，分別進樣。專屬性考察結果表明，各目標峰之間分離度良好，無其他分子量相同的雜質干擾測定，該方法專屬性強。 
　　（3）定量限 
　　試驗數據顯示：對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯和對甲苯磺酸異丙酯定量限濃度均為0.001μg/mL；即樣品檢測濃度為25mg/mL時，樣品中含有0.004ppm的對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯和對甲苯磺酸異丙酯均能被定量檢出。 
　　（4）線性范圍 
　　對甲苯磺酸甲酯在0.040μg/mL～2.203μg/mL濃度范圍內線性方程：y=9.958x+0.591，相關系數：r=0.9989；對甲苯磺酸乙酯在0.125μg/mL～6.877μg/mL濃度范圍內線性方程：y=9.187x+1.297，相關系數：r=0.9992；對甲苯磺酸異丙酯在0.002μg/mL～0.109μg/mL濃度范圍內線性方程：y=6.254x+0.010，相關系數：r=0.9995。 
　　（5）精密度考察 
　　①重復性考察。分別配制供試品溶液6份，依法檢測。對甲苯磺酸甲酯平均含量為0.15ppm，RSD為1.8%，對甲苯磺酸乙酯平均含量為3.42ppm，RSD為2.3%，對甲苯磺酸異丙酯平均含量為0.06ppm，RSD為4.6%。 
　　②中間精密度考察。在同一實驗室，由不同操作者，于不同日期進行檢測。對甲苯磺酸甲酯平均含量為0.13ppm，RSD為1.4%，對甲苯磺酸乙酯3.53ppm，RSD為3.1%，對甲苯磺酸異丙酯0.05ppm，RSD為3.4%。 
　　（6）回收率 
　　分別配制相當于進樣濃度80%、100%、120%的加標供試品溶液，每個濃度配制3份。分別進樣檢測，計算回收率。對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯、對甲苯磺酸異丙酯的回收率分別為99.6%、98.2%、103.8%。 
　　（7）樣品檢測 
　　取樣品，依法測定。