(1)標準曲線的繪制
取六支10ml具塞比色管,按表1配制亞硝酸鈉標準系列。
各管混勻,于暗處放置20min(室溫低于20℃時,顯色40min以上),用1cm比色皿,在波長540nm處,以水為參比測定吸光度。扣除空白試樣的吸光度以后,對應的濃度(μg/ml),用最小二乘法計算標準曲線的回歸方程。
(2)樣品測定
采樣后放置20min(室溫20℃以下放置40mn以上),用水將采樣瓶中吸收液的體積補至標線,混勻,按繪制標準曲線步驟測定樣品的吸光度。
若樣品的吸光度超過標準曲線的上限,應用空白試樣溶液稀釋,再測定其吸光度。
采樣后應盡快測定樣品的吸光度,若不能及時測定,應將樣品于低溫暗處存放。樣品于30℃暗處存放可穩定8h;于20℃暗處存放可穩定24h;于0～4℃冷藏至少可穩定3d。
(3)空試樣的測定
空白、樣品和標準曲線應用同一批吸收液。