1 范圍
本方法適用于十字花科植物含油種子中不同硫甙含量的測定。
2 原理
用甲醇抽提出硫甙,然后在離子交換樹脂上提純和進行酶脫硫。然后用帶梯度洗脫裝置和紫
外檢測的反相高效液體色譜(HPLC)進行測定。
3 試劑
所用試劑,除非另外說明,均需分析純。水符合 ISO3696 標準的 2 級。
3.1 甲醇;
3.2 乙酸鈉溶液;
3.3 咪唑甲酸酯溶液內標(黑芥子硫苷酸鉀單水合物或金蓮葡糖硫苷);
3.4 流動相;
3.5 離子交換樹脂;
3.6 硫酸酯酶。
4 儀器設備
4.1 高效液體色譜;
4.2 HPLC 用色譜柱雙光束光譜儀;
4.3 微型磨;
4.4 聚丙烯管;
4.5 巴斯德移液管。
5 操作步驟
5.1 采樣
取樣見 ISO 5500。
5.2 樣品制備
按 ISO5502 縮減試樣以得到要求的量,必要時可磨粉。
5.3 硫甙提取
稱 100mg 試樣,精確至 0.1mg。試樣經抽提、離子交換、提純和脫硫,得到硫甙。
5.4 測定
用高效液相色譜測定,需做空白試驗。
6 精確度
重復性:
同一分析者在相同實驗室按相同方法對同一試樣連續分析兩次,
絕對偏差不超過 10%。
再現性:不同實驗室、不同分析者用不同設備得到的結果,兩次絕對偏差不超過 20%。