活化部分凝血活酶(APTT)時間測定

活化部分凝血活酶時間測定(activeated partial thromboplasting time，APTT)，是檢測“內源性途徑”凝血因子缺陷的過篩試驗，也是當前用于凝血因子治療、肝素抗凝治療監控以及檢測狼瘡抗凝物(一種抗磷脂自身抗體)的主要手段，其臨床應用頻率僅次于PT或與之相當。
    1  原理  
    在抗凝血漿中，加入足量的活化接觸因子激活劑和部分凝血活酶(代替血小板的磷脂)，再加入適量的鈣離子即可滿足內源抗凝血的全部條件。從加入鈣離子到血漿凝固所需的時間稱為活化部分凝血活酶時間。AFTT的長短反映了血漿中內源凝血途徑和共同途徑中凝血因子的水平。本試驗是目前最常用的敏感的檢查內源凝血系統是否正常的篩選試驗。   
    APTT是從復鈣時間和部分凝血活酶時間(PTT)改良而來。它腦磷脂(比PT測定用的凝血活酶少了蛋白質部分，故名部分凝血活酶)作為血小板代替物，加到乏血小板血漿(PPP)中，同時加入了活化第Ⅻ因子的激活劑。較之PTT，其凝固時間縮短，并且排除了血小板數量和功能對血漿凝固的影響。
    2  儀器  
    本測定所用器材、設備(包括采血、貯血容器及加樣裝置)及要求，與PT完全相同，PT所用自動化儀器同樣適用于本試驗。
    3  試劑
    (1)部分凝血活酶試劑現有商品供應，有的已與激活劑按比例配在一起。常用的激活劑有硅藻土(商品名Celite)、白陶土、二氧化硅微粒、鞣花酸(ellagic acid)等，由廠方配套供應。 
APTT試劑與儀器結合，質量要求為選用Ⅷ、Ⅸ或Ⅺ因子血漿濃度為200～250 U／L(或<30％)時敏感的試劑。
    (2)氯化鈣溶液(25 mmol／L)及其他試劑與PT所用者相同。
    4  標本采集與處理
    (1)樣品的采取、貯存、運送基本與乏血小板血漿制備和PT測定相同。
    (2)接觸活化時間：加激活劑活化Ⅻ因子的時間要保持一致。各儀器和試劑生產廠家的規定可能不一樣，應嚴格按說明書要求進行。手工操作時，應用秒表或其他定時裝置計時。
    5  操作步驟
    (1)最好用已加有定量枸櫞酸鈉溶液的專用硅化真空采血管按要求采集靜脈血，或靜脈采血1.8 ml，加入含有109 mmol／L枸櫞酸鈉溶液0.2 ml的試管中，充分混勻，3000轉／分鐘，離心10分鐘，分離血漿。
    (2)試管中加入預溫的健康人凍干血漿和APTT試劑各0.1 ml，混勻，37℃水浴中預溫3分鐘并輕輕振搖。
    (3)于上述試管中加入預溫的25 mmol／L氯化鈣溶液0.1 ml，混勻，并立即計時，置水浴中不斷振搖20秒后，不時地緩慢傾斜試管，觀察試管內液體的流動狀態，當液體停止流動時停止計時，記錄時間。
    (4)用同樣方法測定待檢血漿的APTT值。
    6  注意事項
    (1)采血要順利，血液與抗凝劑要充分混勻，避免產生微小凝塊。
    (2)采血后應盡快檢測，最遲不應超過2小時，否則凝固時間有縮短的傾向。
    (3)血液離心速度要達到3 000 r／min，時間為10分鐘，盡可能除去血小板，離心后血漿血小板計數應<20×109／L。
(4)血漿加APTT試劑后預溫時間不應少于3分鐘。
    (5)待檢標本檢測前應先測定健康人混合血漿，如果其APTT在允許范圍內方能測定待檢標本。否則，應重新配制APTY試劑。
    7  參考值  
    22～38秒。
    8  臨床意義  
    基本與凝血時間意義相同，但敏感性高。目前所用的大多數APTT測定方法，凡當血漿凝血因子低于正常水平的15％～30％即可異常。
   (1)APTT延長：APTT結果超過正常對照10秒以上即為延長。APTT是內源凝血因子缺乏最可靠的篩選試驗，主要用于發現輕型的血友病。雖可檢出因子Ⅷ：C水平低于25％甲型血友病，但對于亞臨床型血友病(因子Ⅷ>25％)和血友病攜帶者敏感性欠佳。結果延長也見于因子Ⅸ(血友病乙)、Ⅺ和Ⅶ缺乏癥；血中抗凝物質如凝血因子抑制物或肝素水平增高時，凝血酶原、纖維蛋白原及因子V、X缺乏時也可延長，但敏感性略差；其他尚有肝病、DIC、大量輸入庫存血等時也可見APTT延長。 
    (2)APTT縮短：見于DIC，血栓前狀態及血栓性疾病。
    (3)肝素治療監護：APTT對血漿肝素的濃度很為敏感，故是目前廣泛應用的實驗室監護指標。此時要注意APTT測定結果必須與肝素治療范圍的血漿濃度呈線性關系，否則不宜使用。一般在肝素治療期間，APTT維