流式細胞儀主要由四部分組成,它們是:流動室和液流系統;激光源和光學系統;光電管和檢測系統;計算機和分析系統。
1. 流動室和液流系統
流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學玻璃、石英等透明、穩定的材料制作。樣品管貯放樣品,單個細胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出;鞘液由鞘液管從四周流向噴孔,包圍在樣品外周后從噴嘴射出。為了保證液流是穩液,一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用,被檢測細胞被限制在液流的軸線上。流動室上裝有壓電晶體,受到振蕩信號可發生振動。
2. 激光源和光學系統
經特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發才能發出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。光源的選擇主要根據被激發物質的激發光譜而定。
3. 光電管和檢測系統
經熒光染色的細胞受合適的光激發后所產生的熒光是通過光電轉換器轉變成電信號而進行測量的。光電倍增管(PMT)最為常用。PMT的響應時間短,僅為ns數量級;光譜響應特性好,在200~900nm的光譜區,光量子產額都比較高。光電倍增管的增益從10到10可連續調節,因此對弱光測量十分有利。
4. 計算機和分析系統
經放大后的電信號被送往計算機分析器。多道的道數是和電信號的脈沖高度相對應的,也是和光信號的強弱相關的。對應道數年縱坐標通常代表發出該信號的細胞相對數目。多道分析器出來的信號再經模-數轉換器輸往微機處理器編成數據文件,或存貯于計算機的硬盤和軟盤上,或存于儀器內以備調用。計算機的存貯容量較大,可存貯同一細胞的6~8個參數。存貯于計算機內的數據可以在實測后脫機重現,進行數據處理和分析,最后給出結果。除上述四個主要部分外,還備有電源及壓縮氣體等附加裝置。
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