流式細胞術(flow cytometry，FCM)是一種能夠對單個細胞或生物微顆粒的生物學性質進行定量分析和分選的檢測手段，具有快速、高精度、高準確性、多參數和高通量等優點，是目前先進的細胞定量分析技術之一。FCM能夠快速分析單個細胞或粒子的多種特性，既可以定性，也可以定量，尤其適用于大量樣品檢測，已在臨床檢驗工作中得到廣泛應用。流式細胞儀（fluorescenceactivated cell sorter，FACS）的檢測分析已涉及到細胞生物學、免疫學、腫瘤學、遺傳學、血液學、微生物學等學科，此外，五分類血細胞分析儀以及部分尿沉渣分析儀也都采用了FCM原理。
我國流式細胞術的應用現狀
我國流式細胞儀的研制和流式細胞技術的應用歷經30多年的發展，在臨床和科研領域的應用都發揮了非常重要的作用。
流式細胞術應用領域的現狀：
目前我國FCM應用領域主要集中在下列方面(在此僅列出部分代表項目)：
(1)免疫學領域：淋巴細胞亞群檢測，用以評估機體的免疫狀態、輔助疾病如AIDS/HIV的診斷等，是目前各醫療單位開展和應用最廣泛的項目。
(2)血液學領域：主要是血液系統疾病的免疫分型及白血病微小殘留病變(minimal residual disease，MRD)監測，用于血液系統疾病的診斷、治療評估和復發監測。FCM的細胞免疫分型是國際公認的診斷造血細胞疾病必不可少的重要標準之一，是目前被廣泛接受和認可的免疫分型方法。
(3)臨床腫瘤學：主要是DNA倍體和細胞周期分析，了解細胞DNA倍體和增殖能力，異常倍體的出現意味著DNA合成的異常，可能是腫瘤或是癌前病變發生的重要標志。
(4)造血干細胞移植的應用：足夠數量的造血干細胞是造血干細胞移植成功的關鍵因素之一，通過CD34標記和細胞計數微球同時使用，或者具有計數功能的流式細胞儀是鑒定和計數造血干細胞的快速、準確、定量的方法。
流式細胞術在臨床上的常規應用
1、FCM檢測淋巴細胞亞群
FACS利用各種單克隆抗體與淋巴細胞表面的抗原結合，再配合多色熒光染料，同時檢測一種或幾種淋巴細胞的表面抗原，從而將不同功能的淋巴細胞區分開來，并且得到各亞群的相對比例。最常檢測的淋巴細胞亞群包括CD3^+CD4^+T細胞、CD3^+CD8^+T細胞、B淋巴細胞（CD19^+CD20^+）及NK細胞（CD16^+CD56^+）等。通過對不同亞群淋巴細胞相對計數、絕對計數以及比率的觀察，可以監測感染性疾病、免疫性疾病及腫瘤等疾病狀態下機體的免疫狀況，從而輔助診斷、判斷病情變化。例如，CD4^+T細胞膜外CD4分子具有人類免疫缺陷病毒（HIV）識別部位，HIV感染人體后，入侵CD4^+T細胞，大量復制，導致CD4^+T細胞破壞，數量劇減，功能受損，機體免疫機能嚴重缺陷，所以，CD4^+T細胞檢測是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）診斷及病情觀察的重要指標。
2、FCM檢測HLA-B27抗原
HLA-B27基因是脊柱關節病的易感基因，強直性脊柱炎、反應性關節炎、炎癥性腸病相關關節炎、銀屑病關節炎、幼年脊柱關節炎以及未分化關節炎等疾病的發生與HLA-B27均存在不同程度的相關性。研究表明，強直性脊柱炎患者中，HLA-B27抗原陽性率高達91.1%。另外，HLA-B27尚與急性前葡萄膜炎的發生密切相關。FACS采用CD3/HLA-B27雙標記抗體，首先鑒定出T淋巴細胞亞群，再分析其細胞表面是否存在HLA-B27組織抗原。檢測HLA-B27可為上述疾病的診斷與鑒別診斷提供重要依據。
3、FCM在腫瘤標志物檢測中的應用
FACS主要是對腫瘤細胞DNA進行分析以及對腫瘤相關標志物的檢測。正常體細胞均具有較恒定的DNA二倍體含量，DNA二倍體含量改變以及DNA非整倍體細胞群出現，是細胞發生癌前病變或癌變的重要標志。通過對DNA進行染色標記，采用FACS檢測分析，可以精確檢測細胞DNA含量的改變，解析細胞周期，了解細胞的增殖能力，預測腫瘤的預后，指導化療藥物的選擇，確定放療強度、時間。通過對細胞DNA異倍體的監測，還可以為腫瘤的早期診斷及鑒別診斷提供參考。另外，FACS還可以檢測分析腫瘤細胞的增殖活性標志分子、分化標志分子、凋亡標志分子以及免疫學標志物，用于腫瘤發病機制的研究、個性化治療方案的制定以及預后判斷等。
4、FCM在臨床微生物檢測中的應用
FACS快速、靈敏以及可以同時進行多參數分析的優點，使其在臨床微生物檢測中的作用受到越來越多的關注。通過熒光染料標記，不僅可以檢測病原菌、毒素和血清抗體，還可用于抗生素敏感性試驗，對抗生素后效應、細菌耐藥的異質性等進行分析。流式微球分析（CBA）技術是FACS檢測細菌病原體的常用方法，微生物抗原與被異性抗體包被的熒光微球結合，由于抗原的遮蔽效應，使熒光微球的發散光減弱，通過檢測發散光強度的變化來進行診斷，應用不同大小的熒光微球，可同時檢測同一標本的多個病原體，這種方法也可用于真菌、寄生蟲、病毒以及這些病原體混合感染的檢測。FACS體外抗生素藥敏試驗的主要機制是，通過FACS檢測染料與病原體結合后發出的不同熒光強度，間接反映病原體的活性和功能狀態，進而幫助判斷病原體對抗生素的反應性。
5、FCM在外周血細胞分析中的應用
五分類血細胞分析儀是臨床檢驗應用最為廣泛的血細胞分析儀。根據FCM的原理，五分類血細胞分析儀將待測細胞經處理或染色后壓入流動室，與此同時，不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流形成一定角度，這樣鞘液就能包繞著樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細胞在包繞下單行排列，依次通過檢測區域，在激光束的照射下產生散射光和激發光。這兩個光源信號分別反映了細胞體積的大小和內部的信息，經光電倍增管接收后可轉換為電信號，再通過模/數轉換器將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號。多數血細胞分析儀將FCM與激光散射技術、多角度偏振光散射技術、熒光技術、電導/射頻技術等相結合，共同用于血細胞檢測，從而使檢測結果更加準確、可靠。
6、FCM在尿沉渣分析中的應用
目前，一些全自動尿沉渣分析儀也應用了FCM，例如SYSMEXUF系列尿沉渣分析儀就是采用FCM結合熒光染色和半導體激光技術，將檢測通道分為沉渣通道和細菌通道。檢測尿液中的細胞成分時，首先對細胞中的特定物質進行熒光染色并調節到懸浮狀后，使用鞘液包圍此物質，然后通過噴嘴以單柱形式噴出。此時每個尿細胞都將暴露在高度密集的激光束照射之下，單個細胞會按不同角度發出熒光和散射光。熒光反映了細胞表面、細胞質內的性狀以及細胞核的性質，從前向散射光的發光度即可獲知細胞的大小和表面狀態等，系統通過對這些信號進行分析，為尿液中的各種細胞按照熒光強度生成一維直方圖，并按照熒光強度和散射光強度生成二維散點圖，從而進行識別，并做出定量分析。
隨著計算機技術、光源、熒光染料、單克隆抗體、標記技術的不斷進步，更高分辨率、更高速度、更多參數——流式細胞熒光分選技術（FACS）的研發，FCM必將進一步推動檢驗技術和檢驗水平的提高，讓我們拭目以待。