全自動生化分析儀是臨床診斷常用的儀器之一,具有快速、微量、準確、自動化、易于標準化、節省試劑和組合檢驗的優點,現已成為大中型實驗室儀醫院的必備儀器。生化項目的測定方法有很多,如終點法、免疫比濁法、動力學法、固定時間法等等,今天我們就終點法做詳細介紹。sxhlfhf
終點法,根據反應達到平衡時反應產物的吸收光譜特征及其吸光度大小,對物質進行定量分析的方法。對一般化學反應來說,反應完全(或正、逆反應動態平衡)、反應產物穩定時為反應終點。對抗原一抗體反應來說,是抗原和抗體完全反應、形成大且穩定的免疫復合物時為終點。在反應時間進程曲線上為與x軸平行線區段。在測定計算方式上,一般分為一點法和兩點法兩種。
1.一點法,以試劑和樣品混合之前的空氣空白(GB)、水空白(WB)或試劑空白(RB)的吸光度值為測定計算基點,以反應終點的吸光度讀數減去空白讀數,得到反應吸光度。通過與相同條件下校準液反應吸光度的比較,求得測定結果。常與一點校準法配合使用,即采用一個校準濃度,校準曲線通過零點且成線性。也應用多點校準。
2.兩點終點法,即終點一始點法 以試劑和樣品混合之后的某一時間點作為始點,以反應終點的吸光度讀數減去始點讀數。一定條件下可降低樣品對反應或反應本身的特異性于擾(主要指色度干擾)。常采用雙試劑,多以加R2前某一點作測定始點;某些情況下,也可以加R2后一點作測定始點。若使用單試劑,主反應啟動太快或儀器起始讀數點受限時難以運用。
固定時間法與兩點終點法的區別只是在:測定讀數的末點不在反應平衡區段,而是根據方法學選擇。如血清肌酐(苦味酸法)測定。
3.三點終點法,即雙終點法,在一個通道內一次進行兩項反應相關的終點法測定。比如同測游離脂肪酸和甘油三酯。
全自動生化分析儀的出現不僅提高了工作效率,而且減少了主觀誤差,提高了檢驗質量,為疾病的診斷、療效檢測和預后判斷提供客觀的資料和信息,使診斷更準確,更科學。