在干凈的載玻片上滴上一滴蒸餾水，用接種環進行無菌操作，挑取培養物少許，置載玻片的水滴中，與水混合做成懸液并涂成直徑約1厘米的薄層，為避免因菌數過多聚成集團，不利觀察個體形態，可在載玻片之一側再加一滴水，從已涂布的菌液中再取一環于此水滴中進行稀釋，涂布成薄層，若材料為液體培養物或固體培養物中洗下制備的菌液，則直接涂布于載玻片上即可。
基本程序如下：制片→固定→媒染→染色→脫色→復染→水洗→干燥→鏡檢。
根據各種細菌的形態特點，進行判斷得出結論。
