液相色譜柱的類型和使用方法
液相色譜柱根據功能分為HPLC和UHPLC、UPLC柱,根據內徑大小又有常規分析柱,、窄徑柱和毛細管柱的類型區別,其中應用廣泛的液質聯用儀就是用的窄徑柱。因為分析類的儀器主要致力于對樣品成分的判斷,就需要能夠準確分離少量樣品的內徑較小的色譜柱。而內徑孔大的色譜柱用于進樣量大的成品純化和分離。
類型特點決定使用范圍,雖然高效液相色譜柱已經有了很大的發展和先進的技術含量,普通的HPLC柱仍然具有用武之地,這是要與相對應的色譜柱匹配的,只有有效的合作才能實現二者******化的優勢。
不同色譜柱填充物不同,作用和使用范圍也不盡相同,總體來說填充物的粒徑變小讓色譜柱的高效分離性能發揮出來。但也不能一味追求小粒徑,小粒徑不代表樣品通過色譜柱的行徑窄小,也不代表就能將色譜儀的效用發揮******,一切都是需要相互匹配。
類型不同的色譜柱使用方法是完全一樣的,使用前確定好流動相,對樣品進行預處理或者不便處理的就要使用保護柱,雖然會在一些程度上影響***后的效果,但是保護柱帶來的影響遠遠低于允許出現誤差的范圍。
使用結束一定要注意色譜柱的清洗保存,用緩沖溶液進行在線沖洗,注意柱中填充物的穩定性。沖洗結束完全浸泡在合適的溶劑里,防止它受到空氣、水的污染。理論上,合理規范保存的色譜柱能夠使用兩年之久。
如果發現色譜柱的效果大不如前,就試一下看是否因為內部污染造成。嘗試進行在線稀硝酸沖洗,或者將其中的零部件拆下進行分別清洗。也可以試著將里面的填充物取下換上新的。如果這些辦法都不可行,就只有一個方法——更換新的色譜柱。
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