植物中的淀粉酶能將貯藏的淀粉水解成麥芽糖。淀粉酶幾乎存在于所有植物中,其中以禾谷類種子的淀粉酶活性最強。植物中有α–淀粉酶和β–淀粉酶,其活性因植物的生長發育時期不同而有所變化。通過本實驗掌握淀粉酶的提取和測定方法。
原理:
α–淀粉酶和β–淀粉酶,各有其一定的特性,如β–淀粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化,而α–淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化。通常提取液中同時有兩種淀粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15 min以鈍化β–淀粉酶,便可測定α–淀粉酶的活性。或者將提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以處理,鈍化α–淀粉酶,以求出β–淀粉酶的活性。
淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖,可用3,5–二硝基水楊酸試劑測定。由于麥芽糖能將后者還原生成3–氨基–5–硝基水楊酸的顯色基團,在一定范圍內其顏色的深淺與糖的濃度成正比,故可求出麥芽糖的含量。以單位重量樣品在一定時間內生成的麥芽糖的量表示酶活力。
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