淋巴細胞轉化實驗在臨床上應用可用于（1）反映出受試者T細胞總體水平的應答功能，判斷細胞免疫狀態和探討發病機制（2）選擇適宜的移植供體（3）尋找遲發型變態反應的原因（4）估計疾病的療效和預后。
| 實驗方法原理 | 正常機體的T淋巴細胞在體外培養過程中受到特異性抗原或有絲分裂原刺激。可轉化為淋巴母細胞。細胞免疫缺陷時，患惡性腫瘤或某些其他疾病時。轉化率顯然降低。基本原理是采用T淋巴細胞敏感 的刺激物在體外刺激T淋巴細胞，T淋巴細胞受到刺激后可發生形態學和生物化學的變化，部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細 胞，并進行有絲分裂。用形態學法或放射性 核素法檢測T細胞的增值程度，并以此評定相應的細胞功能。 |
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| 實驗材料 | 肝素 |
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| 試劑、試劑盒 | 199培養液小牛血清鏈霉素青霉素PHA |
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| 儀器、耗材 | 注射器針頭試管吸管離心機 |
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| 實驗步驟 | 1. 采肝素抗凝血1~2毫升（1毫升血中加肝素20單位）充分混勻。37℃靜置1~2小時。紅細胞沉淀后，吸取血漿層并捎帶些紅細胞。移入另一無菌試管中。計算白細胞數然后2000 rpm 離心10分鐘。棄上清液。用199培養液將沉淀的白細胞配成1x107/毫升細胞懸液。
2. 取細胞懸液0.6毫升（6x106細胞）加入含有2.4毫升199培養液的培養瓶中。
3. 按每毫升營養液加30 ug PHA加入PHA。
4. 37℃孵育68~72小時。培養過程中，每天翻動培養瓶1~2次。
5. 培養后。振蕩培養瓶。將細胞重新懸起，然后移入試管中。
6. 1000 rpm 離心5分鐘。
7. 盡量棄去上清液，將沉淀物混勻，取一滴放在載玻片上，推成血膜（頭、體、尾分明）干燥，用瑞特氏染液染色）鏡檢。
8. 計算淋巴細胞的轉化率：油鏡下觀察每張玻片的頭、體、尾三段。每段各一縱列（目的是減少推片中細胞分布不均的誤差）。
9. 每張玻片記數200~400個細胞，計算轉化率其中頭部50~100，體部50~100，尾部100~200細胞。 一般認為轉化率的正常值為60~70%
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| 注意事項 | 1. 培養基成分對轉化率影響較大，注意其有效期限。
2. 小牛血清用前需要滅活。
3. 培養時要保證足夠的氣體，保證無菌。
4. PHA劑量過大會對細胞有毒性，PHA轉化反應劑量一般10ml，培養瓶內液體總量不要超過2ml，太小不足以次級淋巴細胞轉化，實驗前先測定。 |
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| 其他 | 淋巴細胞的轉化標準
1. 計算淋巴細胞的轉化率：油鏡下觀察每張玻片的頭、體、尾三段。每段各一縱列（目的是減少推片中細胞分布不均的誤差）
公式：淋巴細胞轉化率=轉化淋巴細胞數/（轉化淋巴細胞數+未轉化淋巴細胞數）×100%
2. 每張玻片記數200-400個細胞，計算轉化率其中頭部50-100，體部50-100，尾部100-200細胞。 一般認為轉化率的正常值為60-70% ；
3. 目前最常用植物血凝素（PHA）作為分裂原來檢測受試者的淋巴細胞轉化率，從而判定其細胞免疫功能，稱為PHA刺激淋巴細胞轉化實驗。
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