工具/原料
RPMI1640 培養液
Hank's 液
刀豆蛋白A（Concanvalin A, ConA），用RPMI1640 液配成1mg/ml，分裝小瓶，冷凍保存
MTT 1mg/ml
2.5%碘酒、75%酒精
方法/步驟
小鼠脾細胞懸液的制備：
取一個滅菌的平皿，加入5ml Hank's液。頸椎脫臼法處死小鼠，取脾臟，放入平皿中，在鋼網上研磨并過篩，制成細胞懸液。取出100μl用于計數。將其余細胞懸液移入一離心管中，離心1500rpm，7min，（或1000rpm，10min）棄去上清，用RPMI1640 培養液稀釋，制成2.5×106 / ml的脾細胞懸液，然后加入ConA使每孔最終濃度為2μg/ml，同時做不加ConA的陰性對照孔。
將上述細胞懸液加入96 孔平底培養板中，每孔0.1ml。
將培養板放入含有5%CO2的37℃培養箱中培養48-72 小時，在培養結束前
4-6 小時，于培養板各孔內加入1mg/mlMTT液，10μl/孔。37℃培養6 小時。
各孔內加入0.01M 鹽酸—異丙醇110μl，30 分鐘內（或加2%SDS 100ul/孔，過夜）用酶標測定儀測OD 值，測定波長570nm。
實驗結果
將實驗組和對照組三個復孔的OD 值平均。
轉化值=實驗組的平均OD 值-對照組的平均OD 值。
END
注意事項
由于本實驗需要培養3 天，才能觀察結果。因此，在操作時應注意無菌操作，避免細菌污染，導致實驗的失敗。
細胞操作要輕柔、迅速，以免細胞損傷影響實驗結果。