一、 實驗試劑：l. 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，PH7.42. 1mmol／L 2，4二硝基苯肼溶液3. 0.4mol/L氫氧化鈉溶液4. 2mmol/L 丙酮酸標準液5. AST底物溶液（DL-門冬氨酸200mmol/L. α-酮戊二酸2mmol/L）：稱取α-酮戊二酸29.2mg和DL-門冬氨酸2.66g，置于一小燒杯中，加人lmol/L氫氧化鈉溶液1.5ml，溶解后加0.lmol/L磷酸鹽緩沖液80ml，用lmol/L氫氧化鈉調至PH7.4，然后將溶液移人100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖浪稀釋至刻度放置冰箱保存。二、 實驗操作：各管混勻后，置37℃水浴箱保溫20min，然后每管加入0.4mol/L氫氧化鈉溶液5ml，室溫放置5min，用分光光度計在波長505nm處以蒸餾水調零點，讀取各管吸光度，測定管吸光度減去樣本對照管吸光度，從標準曲線套得AST活動單位。標準曲線繪制：參考值：8-28卡門單位。
l. 本法的缺點是標本AST活性高時草酰乙酸對AST現實反鎖抑制，使測定結果偏低，酮血癥中乙酰乙酸及β-羥基丁酸，因沒對照管不會引起測定結果假性偏高。2. 若用L-門冬氨酸稱量為1.33g。3. 等血清酶活力超過15O卡門單位時，應將血清用生理鹽水稀釋5倍或10倍后再進行測定。4. 底物中的α-酮戊二酸和2,4-二硝基苯肼為顯色物質，稱量必須準確，每批試劑的空白管吸光度上下波動范圍不應超過0.015A，如超出范圍應檢查試劑和儀器方面問題。
