拉曼光譜 拉曼技術已經存在很多很多年了。目前最常見的是被應用在關于長波激光的正斯克托斯拉曼信號上(使用長通二向色鏡和長通發射片)。有時候,研究者更喜歡看負的斯克托斯拉曼反應(使用短通二向色鏡和帶通或短通發射片)。每一種應用都需要特殊的鏡片或濾光片,但是主要的要求是盡最大努力阻塞激光,因為拉曼信號非常低。通常拉曼信號太低,所以光學鏡片包括純化濾光片和發射片必須采用熔融石英玻璃而不是浮法玻璃制作,以減少系統中出現的任何的自發熒光。此外,二向色鏡和發射片還必須被設計得盡量靠近激光束。幸運地是,許多正的斯克托斯實驗能夠使用長通發射片,這種發射片更容易設計成離激光束只有幾毫微米,并且仍然能獲得最佳的激光過濾效果。如圖11。
激光阱和光鑷 通常,這些系統使用一個1064納米的激光束或者類似聚焦束照射標本平面。為了達到這個目的,大多數的系統使用一個能反射近紅外光(NIR)和透射可見光的長通分色鏡。此外,所有的發射片必須能夠阻塞激光阱,就像上面描述的類似于雙光子的阻塞。如圖12。
流式細胞術 由于流式系統使用激光器,即使一些規格由于這些機器固有的能力通過在其計算中使用激光光散射和激發光來消除噪音得以放寬,他們也需要特別考慮。這些系統不使用成像組件通常是不能成像的。流式細胞儀光學檢測技術的最大的挑戰之一就是從越來越多的熒光染料中同時收集信號所帶來的困難。這就意味著二向色鏡(可能是長通也可能是短通,這要取決于設備的設計)和發射片在相同的發射路徑中可能被設計成適合4到6種不同的熒光染料。這就迫切需要將分色鏡設計得非常陡,并且陡而窄的發射片設計還必須滿足市場上不同流式系統一般化設計的要求。
總結
總而言之,激光鏡片必須被設計成不同于標準的寬場濾光片和鏡片。盡管事實上大多數的激光鏡片在寬場應用中非常好,單反過來卻不一定正確,就像上面講到的案例中的不同規范。在每一個激光應用中,設計和構造的不同對于最終的用戶而言不會太明顯。然而,在大多數實驗中,如果這些規格要求不被滿足,那么這些不同將會明顯令人感覺到痛苦,特別是在要求更多的應用中,例如全內反射熒光顯微鏡,拉曼顯微鏡和多光子顯微鏡。
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