（一）材料和試劑
1、PH8.6，0.1M巴比妥--巴比妥鈉緩沖液
巴比妥鈉 10.3 g
巴比妥 1.84 g
硫柳汞 100 mg（防腐劑）
蒸餾水加熱溶解并定容至500ml
2、1%預復瓊脂（或瓊脂糖）
1g瓊脂（或瓊脂糖）加蒸餾水100ml溶化即可。
3、1.5%瓊脂糖凝膠
1.5g瓊脂糖加50ml蒸餾水置水溶中煮沸溶解或用與波爐加熱溶解（注意不要溢出且注意加入蒸發的水），然后再加入50ml上述巴比妥緩沖液混勻，置4℃保存備用。
4、抗原及相應免疫血清。
（二）設備和器材
玻璃板、模具，打孔器和挑針、滴管、有蓋搪瓷盒（內鋪有濕潤的濾紙）、溫箱（25℃）、三角燒杯、玻璃攪拌、微量加樣器、其他常用器材。