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  • 發布時間:2020-02-01 21:52 原文鏈接: 牛陀螺狀細胞貼壁培養技巧

    BT牛陀螺狀細胞貼壁生長特性:

    1、一個一個做!防止污染,和消化細胞時間的不均勻。

    2、原則上,為了避免細胞系之間的污染,應該一個一個的做。但是如果你能保證無菌操作的原則,也能把握好各種貼壁細胞系消化的時間,是可以同時做,這樣效率高。建議你剛開始一個一個的做,熟練以后根據具體情況決定如何做。

    3、4個可以同時做,時間到了用移液槍給4個瓶加含血清的培養基終止就行。

    4、新手的話強烈建議一個一個處理細胞,特別是消化,除非你養的細胞對消化都不敏感,不然很容易消化過度或者不到位。另外同時處理多個細胞容易出現細胞間交叉污染,一旦污染基本沒救,比細菌污染還要麻煩。

    5、剛開始還是一個一個來,BT牛陀螺狀細胞消化的時間與細胞的來源有很大關系,貼壁性強的細胞,需要消化的時間較長。一般除了貼壁性強的癌細胞外,細胞消化時間1-3min,還有胰蛋白酶的濃度有關系,濃度高的消化時間要短一些,不然會消化過了,對于細胞的生長不好。你可以在分散打入胰蛋白酶時,輕晃培養瓶,在顯微鏡下看見細胞開始變亮,皺縮,卷邊的時候就加入培養液或者血清終止消化。

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