2.結果
2.1 實驗室檢查
抽血查免疫全套檢測免疫力及特異性免疫抗體。免疫抗體陰性，無自身免疫疾病。CD4、CD8數量基本正常，免疫功能基本正常。Anti-HIV陰性。但IgE升高明顯（218.7 U/mL，正常值0.1~150 U/mL），中性分葉核細胞增高（7.56×109/L，正常值1.8~6.3×109/L），提示感染血象。
2.2 原代涂片鏡檢結果
原代涂片發現唾液中有大量極長鏈的細菌，需要3~4個100×視野才能照完長鏈，如圖1；齲損樣本中有螺旋體和彎曲菌，黏膜拭子涂片顯示菌極少，有部分鏈球菌、桿菌和放線菌（結果未顯示）。
圖1 唾液樣本原代涂片鏡檢革蘭染色圖
2.3 細菌原代培養總體情況
選擇培養基科瑪嘉中可見變異鏈球菌（C.albicans）在全菌斑中含量最多，為2100 CFU/mL，唾液中為550 CFU/mL（表1）。4種樣本中MS、Rogosa選擇培養基中的鏈球菌和乳桿菌數量巨大，難以計數。基礎培養基分離培養過程中并未見到原代涂片中極長鏈的細菌，唾液中總菌含量最高（7.6×107 CFU/mL），齲損中溶血菌含量最高（43.5%，表2）。
表1 初代科瑪嘉平板中真菌的數量
表2 初代BHI血平板中的溶血菌數量
2.4 細菌分離鑒定結果
以全菌斑稀釋10-4（A4），挑取不同外形的菌落，傳代至純種，經生化和DNA測序鑒定，結果如表3所示。
表3 不同標本中細菌分離鑒定結果
全菌斑分離出多種鏈球菌（如戈登鏈球菌、變異鏈球菌、中間鏈球菌、咽峽炎鏈球菌）、齲損菌斑中多次分離到變異鏈球菌以及蘇黎世鏈球菌，Rogosa選擇培養基分離了多種乳桿菌，另外還鑒定了棲牙普雷沃菌、具核梭桿菌、殊異韋榮菌、韋德纖毛菌和戴安娜月形單胞菌。
2.5 變異鏈球菌含量
如圖2所示，變異鏈球菌（S.mutans）在4種樣本中含量均較高，其中黏膜樣本（N）的相對含量最高，與健康組H1、H2相比均有顯著差異；Q和T中的變異鏈球菌相對含量也顯著高于健康組中的H2（P<0.05）。
圖2 qPCR檢測S.mutans相對含量
2.6 DGGE結果
患者RC中A、N、Q和T與健康組（H1，H2）及另兩例猖獗齲（RC1，RC2）相比，DGGE示（圖3）細菌多樣性（條帶數）明顯降低，但豐度明顯增強（條帶亮度）；T的多樣性最高、N最少；變異鏈球菌在4種樣本均有檢出；血鏈球菌無明顯條帶；干酪乳桿菌有較弱條帶。切取差異明顯的13條帶進行分子鑒定，其中5個條帶為纖毛菌特征條帶。
圖3 DGGE檢測細菌多樣性及目的條帶測序鑒定