豬胰激肽釋放酶生產新工藝

（1）概況

激肽釋放酶（kallikrein）屬絲氨酸蛋白酶。廣泛存在于血漿、胰、腎、頜下腺及尿中。藥用激肽釋放酶又稱血管舒緩素，主要來自頜下腺或胰腺。

激肽釋放酶能使毛細管和動脈血管舒張及通透性增加，使冠狀血管動脈﹑腦﹑視網膜處的血流供應量增加，適用于高血壓冠狀血管及動脈血管硬化等癥，對心絞痛﹑血管痙攣﹑肢端感覺異常﹑閉塞性血栓性﹑脈管炎﹑凍瘡及創傷等癥也有作用。

（2）技術特點

本技術采用鹽析與疏水層析法相結合從豬胰臟中分離純化激肽釋放酶，純度大于500u/mg，工藝收率達到85.0%以上，該工藝步驟簡單、快速、回收率高，產品純度高、穩定性好。且豬胰臟中還含有大量的胰酶、彈性蛋白酶、脂肪酶等，因此，疏水層析收集的非    目標蛋白洗脫液還可用作分離純化其它幾種酶的原料。

本實驗中經過鹽析處理后的上清液中鹽濃度較高，可以直接作為疏水層析進料，不需要額外的處理步驟。

（3）市場分析

激肽釋放酶與同類化學合成藥相比，它具有易為人體吸收﹑代謝副作用小，長期使用安全的特點。

胰K的提取純化方法很多，常見的有硫酸銨沉淀法﹑離子交換層析法﹑有機溶劑分級、親和層析法等。目前，國際上基于胰K的純化研究大多采用陰離子交換（通常為DEAE配基）結合陽離子交換（通常為CM配基）最后加一步凝膠過濾層析，并且離子交換過程中胰K洗脫都采用改變pH的方式，由于緩沖液的緩沖作用，使得柱內pH改變緩慢，周期延長，耗費大量緩沖液，如法國Graham S.Bailey的純化過程，雖然經過三步純化后胰K比活高達1254u/mg,可是收率只有28.4％；其次有采用離子交換層析與疏水層析結合或者離子交換層析與親和層析相結合，步驟較多、純化周期較長且成本也較高，如英國Talal S.EI.Thaher的純化過程，雖然收率達到87％，但胰K比活只有156.3u/mg。

（4）合作方式：

　　  技術轉讓。