理化分析方法的準確度驗證

　　準確度

　　準確度定義為測定值與真實值或認可的參考值之間接近的程度。準確度也可以定義為方法的測定值與真實值接近的程度。

　　準確度為定量測定的必要條件，因此涉及到定量測定的檢測項目均需要驗證準確度，如含量測定、雜質定量試驗等。準確度試驗濃度應能覆蓋整個考慮范圍，并且應包含接近定量限的濃度點，濃度范圍的中間值，還有校正曲線的最高點。

　　a) 含量測定

　　原料藥可用已知純度的對照品或符合要求的原料藥進行測定，或用本法所得結果與已建立準確度的另一方法測定的結果進行比較。

　　制劑可用含已知量被測物的各組分混合物進行測定。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進行測定，必要時，與另一個已建立準確度的方法比較結果。

　　準確度也可由所測定的精密度、線性和專屬性推算出來。

　　b) 雜質定量試驗

　　雜質的定量試驗可向原料藥或制劑中加入已知量雜質進行測定。如果不能得到雜質，可用本法測定結果與另一成熟的方法進行比較，如《中國藥典》方法或經過驗證的方法。

　　如不能測得雜質的相對響應因子，可在線測定雜質的相關數據，如采用二極管陣列檢測器測定紫外光譜，當雜質的光譜與主成分的光譜相似，則可采用原料藥的響應因子近似計算雜質含量（自身對照法）。并應明確單個雜質和雜質總量相當于主成分的重量比（％）或是面積比（％）。

　　c). 中藥化學成分測定方法的準確度

　　可用對照品進行加樣回收率測定，即向已知被測成分含量的供試品中再精密加入一定量的被測成分對照品，依法測定。用實測值與供試品中含有量之差，除以加入對照品量計算回收率。在加樣回收試驗中須注意對照品的加入量與供試品中被測成分含有量之和必須在標準曲線線性范圍之內。

　　d). 校正因子的準確度

　　本文中的校正因子是指氣相色譜法和髙效液相色譜法中的相對重量校正因子。絕對（或定量）校正因子是指單位面積的色譜峰代表的待測物質的量，待測定物質與所選定的參照物質的絕對校正因子之比，即為相對校正因子。

　　校正因子的測定有單點多點法、標準曲線法及吸收系數比值法。標準曲線法采用替代物（對照品）和被替代物（待測物)標準曲線斜率比值進行比較獲得相對校正因子；采用紫外吸收檢測器時，可將替代物（對照品）和被替代物（待測物）在規定波長和溶劑條件下的吸收系數比值進行比較和計算。

　　根據線性方程的斜率（k）比計算校正因子，即校正因子=k主成分/k雜質，其可接受標準建議為：

　　① 校正因子在0.9～1.1之間修約為1.0，當其小于0.9時保留小數點后兩位，當其大于1.1時保留小數點后一位,另有規定的除外：

　　② 當校正因子為法定標準收載的，偏差在10%以內取法定標準數值，若偏差大于10%應考察其原因，經分析為非方法和人為誤差引入的，則按實際測定值作為校正因子；

　　③ 當校正因子在0.2～5.0之外時需要考察方法是否需要可行或更換為雜質外標法。

　　使用加校正因子的自身對照法測定雜質時，相對校正因子的準確度測定可配制相同的供試品溶液，同時采用加校正因子的自身對照法及外標法對供試品中的雜質進行測定，并對兩種方法的結果進行比較。

　　e).準確度數據要求

　　在規定范圍內，取同一濃度（相當于100%濃度水平）的供試品，至少測定6份樣品的結果進行評價；或設計3種不同濃度，每種濃度分別制備3份供試品溶液，用9份樣品的測定結果進行評價。化學藥應報告已知加入量的回收率（％)，或測定結果平均值與真實值之差及其相對標準偏差或置信區間（置信一般為95% )；中藥應報告供試品取樣量、供試品中含有量、對照品加入量、測定結果和回收率（％)計算值，以及回收率（％ )的相對標準偏差 （RSD%)或置信區間。校正因子應報告測定方法、測定結果和RSD%。樣品中待測定成分含量和回收率限度關系可參考下表。基質復雜、組分含量低于0.01%及多成分等分析中，回收率限度可適當放寬。